酵母菌基因組DNA的提取實驗——基本方案

酵母菌

SE緩沖液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K緩沖液Tris

高速冷凍離心機臺式離心機恒溫水浴低溫冰箱冷凍真空干燥器取液器電泳儀水平電泳槽紫外觀測儀

1.  1.5 ml  對數生長期細菌細胞。

2.  離心，12 000 rpm，1-2 min。

3.  沉淀。

4.  溶于590 ul SE緩沖液中混勻+10 ul 溶菌酶37℃，1 hr。

5.  離心，12 000 rpm，8~10 min。

6.  沉淀。

7.  溶于100 μL，0.5 μl 蛋白酶K，混勻，37℃，1 hr。

8.  加入1.2 ml 的CTAB/NaCL，200 μl 2 0%PVP 混勻  65℃，30 min。

9.  等體積酚/氯仿/異戊醇混合液，混勻。

10.  離心，12 000 rpm，4~5 min。