四、酵母菌生長曲線的測定試驗
1、將培養24小時左右的酵母斜面菌種,用無菌水洗下菌苔,以3000轉/分的速率離心,得菌體。將酵母菌體沉淀物再用無菌水洗2-3次后,制備酵母菌懸液(細胞數量約106左右/毫升),測數備用。
2、取上述菌懸液1毫升于盛有清亮的酵母增殖培養液的試管中,<25℃>下培養,以此為起始時間,記錄起始溶液的細胞數。并在培養1,2,4,6,8,9,10,11,12,14,16,20,22,24小時時分別取樣檢測酵母菌細胞數量。
3、酵母菌細胞數量的檢測
方法①:活菌計數法。此法是將以上定時取出的被檢樣品作一系列稀釋后,取一定量體積(在0.1-1毫升之間)的稀釋液涂布于盛有固體培養基的培養皿內,在<25℃>下培養24小時左右,計算培養皿內菌落數就可測出溶液中活菌數量。
方法②:血球計數板計數法。此法是先將以上定時取出的被檢樣品作一系列稀釋后,使菌落數約為105-106個/毫升,取一滴稀釋液滴于血球計數板內,在顯微鏡下直接計算細胞總數。
4、繪制生長曲線
以酵母菌細胞數的對數作為縱坐標,以培養時間作為橫坐標,畫出酵母菌的生長曲線。并分析酵母菌群體的生長規律。
附表1 酵母菌分屬鑒定結果
菌種號 | 形態特征 | 生理特征 | |||||||||||||||
群體 | 個體 | 假菌絲 | 子囊孢子 | 葡萄糖發酵 | 類淀粉化合物的生成 | 硝酸鉀同化 | 肌醇同化 | 其他 | |||||||||
巨大菌落 | 沉淀 | 瞨 | 環 | 島 | 細胞形狀大小 | 無性繁殖方式 | Kleyn | Gorodkowa | 馬鈴薯塊 | 石膏塊 | |||||||
附表2酵母種的鑒定結果記錄
菌株 | 形態特征 | 生理特征 | |||||||||||||||||||||||||
糖發酵 | 糖同化 | ||||||||||||||||||||||||||
菌落 | 瞨膜 | 細胞形態大小 | 無性繁殖方式 | 假菌絲 | 子囊孢子 | 葡萄糖 | 乳糖 | 半乳糖 | 麥芽糖 | 蜜二糖 | 蔗糖 | 棉子糖 | 葡萄糖 | 乳糖 | 半乳糖 | 麥芽糖 | 蔗糖 | 纖維二糖 | 蜜二糖 | 海藻糖 | L阿拉伯糖 | D阿拉伯糖 | 棉子糖 | D木糖 | 可溶性淀粉 | 山梨糖 | |
菌株 | 氮源同化 | 醇類同化 | 在無維生素培養基上生長 | 其他 | 維生素需要 | ||||||||||||||||||||||
硝酸鉀 | 硫酸銨 | 乙醇 | 甘油 | 山梨醇 | 衛矛醇 | 赤蘚醇 | 阿東醇 | 肌醇 | 甘露醇 | 牛奶反應 | 油脂分解 | 抗放線菌酮 | 產生類淀粉 | 于37℃生長 | 耐高滲透壓 | 生物素 | 微生素B1 | 微生素B2 | 微生素B6 | 微生素B12 | 葉酸 | 煙酸 | 泛酸鈣 | 對氨基苯甲酸 | |||