酵母遺傳學方法12：酵母菌落PCR方法

酵母菌落PCR方法

1．在冰上配制反應混合液：

2μl                  10×菌落PCR緩沖液

1.2μl                 25mmol/L MgCl₂

0.4μl                 10mmol/L dNTPs

10pmol                引物（每一種引物）

0.2μl                 Taq DNA聚合酶（5U）

加水到總體積為20μl

2．用移液器加微量細胞（約0.25μl）到PCR反應混合液中（20μl反應體積）

3．PCR循環參數：

94℃          4分鐘

94℃          1分鐘

55℃          1分鐘

72℃          2分鐘

35個循環

72℃          10分鐘

4．上全部樣品進行瓊脂糖電泳。