酶免疫電泳技術

抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負電，向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合物是用底物顯色的，由于酶反應的高度靈敏性，使酶免疫電泳技術成為一項靈敏度高的檢測技術，但僅局限于酶蛋白的分析鑒定。

感染病毒的植物病葉

兔抗酶抗體瓊脂糖巴比妥鈉鹽酸緩沖液供氫體混合液

電泳儀恒溫箱打孔器搪瓷盒

1.將小玻棒放在潔凈的載玻片中央，然后將3ml溶化的瓊脂糖溶液（0.8g瓊脂糖/100ml巴比妥鈉鹽酸緩沖液）澆制其上，待冷凝后，用針尖挑去玻棒，中央出現一穴槽。

2.在穴槽一端的兩側近邊沿2mm處各打一小孔（直徑2——3mm），在一孔穴中加入健株葉片汁液，在另一孔穴加入感染病毒的植株葉片汁液。

3.加汁液的孔穴一端接負極，電泳緩沖液仍是0.1mol/LpH8.6巴比妥鈉鹽酸緩沖液，電壓150V，電泳1h。

4.在穴槽加入抗HRP兔血清，置于濕盒中，在37℃溫箱中反應3h左右或室溫過夜。

5.在生理鹽水中浸洗3——4天，每天換水3次。

6.敷上干凈的濕濾紙，置于40℃烘箱內烘干。

7.浸入底物顯色，從沉淀弧的形狀，部位不同，比較健，病汁液所形成的沉淀線。

1.陽性反應：在抗原抗體孔之間呈現明顯的棕紅色的線條。

2.陰性反應：不出現棕紅色線條者。