酶活性測定樣品的貯存及處理

測定活性之前所貯的樣品酶活性有了降低，無論所用的儀器如何先進，也不能獲得準確的結果。在適當的條件下酶會失活，因而必須強調在收集樣品之后應盡可能快速測試酶活性，最好當天進行測定。關于酶樣品的貯存與處理應注意以下幾點：

1.酶活力測定最常用的樣品是血清或血漿。制備血漿所用的抗凝劑可抑制某些酶的活性，如EDTA能抑制ALP，草酸鹽抑制LDH，肝素對CK及某些其他酶有輕微的抑制作用，故一般樣品以血清為佳醫|學教育網搜集整理。

2.多數血清酶以較高濃度存在于紅細胞、白細胞或血小板中。因此分離血清時應注意避免溶血。

3.光照對CK活性有抑制作用。因此，主張CK測定的血清應貯存于4℃的暗處，測定時應該注意避光。

4.由于血清白蛋白對酶蛋白有穩定作用。在它的存在下，某些酶在室溫下可保存1～2天而無明顯失活。

5.有些酶由于自身的特性。在貯存時需特別加以注意。例如LDH同工酶在冰箱保存不穩定，在室溫反而穩定時間較長，所以測定LDH活力的血清樣品，應置于室溫下，2～3天內可保持穩定，不能存放冰箱過夜。

6.由于酶很容易發生表面變性。因此在操作時應避免形成泡沫。

7.巰基對于大多數酶來說是十分重要的，可能起如下幾方面的作用：

①參與催化；

②和底物結合；

③組成變構部位；

④維持酶的三級或四級結構。

因此，使巰基保持天然狀態是使許多酶穩定化的最重要的條件之一，基于這個理由，在酶的活性測定、抽提、制備以及保存過程中，常可添加－SH保護劑，如半胱氨酸、谷胱甘肽、2－巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇等。