實驗方法原理 PNH患者的紅細胞由于本身有缺陷,對補體敏感性增高,在酸化的正常血清中,(PH6.0-6.8)經37℃孵育,易破壞溶血.此法較敏感,假陽性少。
實驗材料 末梢血
試劑、試劑盒 HClNaCI溶液
儀器、耗材 離心管
實驗步驟
一、 實驗試劑:
1. O.2mol/L HCI
2. 8.5g/L NaCI溶液
二、 實驗操作:
l. 用 10ml離心管1支,加8.5g/L NaCI溶液5-6ml,再加患者末梢血10余滴.混勻,離心奔去上清液。如此重復洗滌紅細胞2次,最后配成50%紅細胞懸液.
2. 取與患者同型或AB型血3-5ml,待其自然凝固,分離,正常人血清(最好采用多人混合新鮮血清,以保證有足夠補體).
3. 將上述同一正常人血按操作“l”制備 50%紅細胞懸液,作正常對照按表操作.
4. 置37℃水浴中l小時,觀察結果
 5. 實驗結果判斷:
(1)試驗管溶血對照管不溶血為陽性。
(2)試驗管和對照管都不溶血為陰性 |
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| 注意事項 | 1. 血清酸化后.試管必須塞緊,否則二氧化碳逸出.可使血清酸度下降.
2.抗凝劑會影響PH值,故不宜用抗凝血清.但可用脫纖維血.
3. 為了保證補體充足,最好用混合血清,但正常對照紅細胞必須用“O”型.
4. 如患者曾經多次輸血,血中異常紅細胞相對減少.本試驗可為弱陽性或陰性. |
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