試劑、試劑盒 甲醇（50% 和5%v v)二硫蘇糖醇 AgNO3檸檬酸（固態)顯影液
實驗步驟
試劑
甲醇（50% 和5%v/v)
10umol/L二硫蘇糖醇（DTT)
AgNO3(0.1%w/v)
檸檬酸（固態)
顯影液
操作程序
此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下，凝膠在旋轉平臺上緩慢搖動，并進行下列步驟。
1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。
2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。
3)用H2O迅速洗3次。
4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。
5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。
6)先用H20快速洗1次，然后用顯影液洗2次，每次不超過15s。
7)在顯影液中浸泡數分鐘，直至顯現蛋白質帶。
8)加入固體檸檬酸（雙水合物）（每200 ml顯影液加約10 g檸檬酸)，停止顯影。
9)用鋁箔蓋住凝膠（使避光)，繼續浸泡10 min。
10)用H2O徹底清洗。凝膠在鋁箔下（在暗處）H2O中浸泡10 min。再置（暗室）H20中過夜，使蛋白質條帶顯色。
如需要，凝膠可在4% 甘油中浸泡>lh，然后干燥。