實驗方法原理
間接血球凝集試驗是根據紅血球表面的吸附作用而建立起來的。將細菌可溶性抗原提出使之吸附于紅血球表面，此時紅血球即稱為“致敏紅血球”。這種致敏的紅血球具有細菌的抗原性，與相應的抗血清相遇可產生凝集現象。間接血凝抗原的制備可用加堿或加熱的方法使菌體中的多糖物質浸出，去除類脂以免干擾紅血球的吸附作用。但如系蛋白質時則用來吸附的紅血球需先用鞣酸予以處理。
實驗材料 抗原
試劑、試劑盒 綿羊紅血球懸液生理鹽水
儀器、耗材 試管吸管
實驗步驟
1. “O”抗原的制備：
將每毫升100億的傷寒桿菌“O”菌懸液，置100℃水浴中2小時，離心沉淀吸取上清夜，分裝無菌試管，放4℃冰箱備用。
2. 致敏紅血球懸液制備：
取一定稀釋度的抗原加等量2.5%綿羊紅血球懸液，混合后放37℃水浴箱中，每隔15分鐘取出振搖一次，共經2小時。然后取出，用生理鹽水洗滌3次，而配制成0.5%懸液即成。
3. 實驗步驟：
（1）小試管9只標好號碼于試管架上。
（2）第1管加入0.9毫升生理鹽水，其余各管各加入0.5毫升。
（3）以吸管吸取已加熱滅菌的免疫血清0.1毫升加入第1管，混勻后吸取0.5毫升注入第2管，同樣第2管的血清與鹽水混勻后吸取0.5毫升注入第3管。如此依次稀釋直至第8管。自第8管吸出0.5毫升棄去。第9管不加血清作對照。
（4）于每管加入0.5毫升已經致敏的0.5%綿羊紅血球懸液，混勻后放入37℃水浴中2小時后觀察結果。凡最高血清稀釋度的免疫血清試管中呈現完全血凝者，即為該血清的間接血清效價。