婦科陰道分泌物常規檢測(簡稱白帶常規)是女性泌尿生殖道健康水平的一項重要醫學檢查項目,主要用于監測女性泌尿生殖道感染與否及種類。特別是孕前女性白帶常規篩查尤為重要,患有陰道炎癥的女性在受孕時會影響精子的質量甚至導致不孕,即使懷孕孕期也很容易引起宮內感染、產道感染等環節感染新生兒,造成流產、早產、先天發育畸形、智力低下等嚴重后果。因此通過白帶常規篩查細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、念珠菌性陰道炎等陰道疾病對女性優生具有重要的意義。
白帶常規因醫院及習慣不同,具體涉及的檢測項目有些差異,但不外乎以下項目:pH值、白細胞(清潔度)、淋球菌、胺試驗、線索細胞、念珠菌、滴蟲。
由于鏡檢淋球菌只適合個別標本,針對性強,不能作為常規項目。因此白帶常規中有實際操作意義的項目是白細胞(清潔度)、線索細胞、念珠菌、滴蟲,另外乳酸桿菌由于其具有輔助判斷作用也有醫療單位作為白帶常規的項目之一。
近年來,白帶常規一直采用顯微鏡鏡檢的方法,但是顯微鏡鏡檢存在諸如經驗要求高、主觀性強等缺點,在顯微鏡質量及涂片的均勻度等方面受限,而且僅從形態學上來鑒別,在靈敏度和特異性方面也存在嚴重問題,現今已無法完全滿足臨床檢測的需求。近年來國內外一些科研單位有從事酶學等方法應用于白帶常規檢測的研究,其為白帶常規檢測技術發展起到了巨大的推動作用。
乳酸桿菌檢測 乳酸桿菌為女性陰道的優勢菌群,對有害菌諸如陰道加特納氏菌等有抑制殺滅作用,過氧化氫是陰道微生態菌群中有益菌乳酸桿菌特別是產過氧化氫的乳酸桿菌的一種代謝產物,因此可以通過檢測過氧化氫來反映陰道內乳酸桿菌量的多少。
白細胞檢測 白細胞酯酶是白細胞膜上的一種蛋白質,炎癥感染時白細胞特別是多形核白細胞由于趨化作用通過陰道上皮細胞粘膜滲透到分泌物中,通過檢測分泌物中的白細胞酯酶活性可間接地指示白細胞的多少。
細菌性陰道病(BV)檢測
BV檢測試劑有兩種方法學,改良胺試驗克服了傳統胺試驗靈敏度低、主觀性強的缺點;唾液酸苷酶又稱神經氨酸苷酶,在陰道環境中,唾液酸苷酶活性與BV密切相關,與檢測Amsel法有較高的符合率,國內外在相關試劑的研發上都做了大量工作,并已有產品用于臨床檢測。但是陰道微生態菌群中,普雷沃菌和擬桿菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌,部分加特納氏菌有此酶活性,而動彎桿菌、消化球菌以及人型支原體的此酶活性基本不能檢出。另外,BV不是單一而是多種厭氧菌增多引起的,因此單純依靠檢測分泌物中唾液酸苷酶的活性,必然漏檢唾液酸苷酶活性低的厭氧菌增多引起的BV,另有研究顯示脯氨酸氨基肽酶與加德納菌和動彎桿菌相關,可以通過脯氨酸氨基肽酶活性的增加來指示BV,但是研究表明單純由于普雷沃菌和擬桿菌增多引起的BV不含有脯氨酸胺基肽酶,因此也存在方法學上的漏檢,但是將唾液酸苷酶結合脯氨酸氨基肽酶的檢測,理論上可以檢測95%以上的BV陽性。
念珠菌檢測
隨著抗生素、腎上腺皮質類固醇類藥物的廣泛應用,念珠菌病發病率逐年增高,白色念珠菌是最常分離到的致病酵母菌,因此,快速、準確地鑒定白色念珠菌具有重要的臨床意義。脯氨酸氨基肽酶可由多種厭氧細菌和真菌產生,其也為白色念珠菌的特異性酶,乙酰氨基葡萄糖苷酶為白色念珠菌、熱帶念珠菌的特異性酶,因此可以通過檢測脯氨酸氨基肽酶活性和乙酰氨基葡萄糖苷酶來指示念珠菌感染。
滴蟲檢測
研究表明滴蟲具有乙酰氨基葡萄糖苷酶特異性酶,因此可以通過檢測乙酰氨基葡萄糖苷酶檢測滴蟲。由此通過乙酰氨基葡萄糖苷酶檢測無法區分念珠菌和滴蟲,但念珠菌白帶pH在4.0-4.6,滴蟲白帶pH可大于5-6,通過大量研究念珠菌白帶pH不大于4.6,而滴蟲白帶pH不小于4.8,通過結合pH值可將二者區分開。
綜上,將酶學的方法應用于白帶常規檢測項目檢測中,只需檢測過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH。
酶學方法檢測與顯微鏡鏡檢技術優缺點比較見下表:
目前國內有某細菌性陰道病三聯檢試劑盒(簡稱:某三聯件),但是只能檢測乳酸桿菌、白細胞(清潔度)、線索細胞,或者加上pH值,不能檢測念珠菌和滴蟲,同時存在漏檢唾液酸苷酶陰性的厭氧菌增多引起的BV這一缺點。美國Femlab陰道炎檢測試劑盒名為陰道炎六聯檢,但不能檢測念珠菌,而且存在諸如檢測意義不明確、三項指標都檢測陰道炎、BV與滴蟲無法區分、漏檢滴蟲等缺點。某陰道炎五聯檢試劑盒(簡稱:某五聯檢)通過檢測過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH六項指標可以檢測乳酸桿菌、白細胞、BV、念珠菌、滴蟲五個項目。
幾種相關技術的比較見下表:
綜上所述:據此酶學方法產品化后的陰道炎五聯檢試劑盒的研究,其在功能方面實現了白帶的常規檢測,可以互補甚至替代顯微鏡鏡檢。此研究在醫學檢測領域將是一個突破,一個新的發展。