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  • 發布時間:2022-10-24 14:39 原文鏈接: 阻斷ELISA的操作程序

    本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測方法。下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序:

    ① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干

    ② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干

    ③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干

    ④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

    ⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干

    ⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液

    ⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。

    本試驗同時設標準陰、陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。


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