【關鍵詞】 丙氨酸氨基轉移酶;保存溫度;集中化檢測;標本貯存
集中化檢測機構除了要對本單位的血樣進行檢測外,同時承擔送檢機構血樣檢測,受送檢單位采血量多少以及運輸條件的影響,送檢單位采集的血液標本很難做到立即檢測,由于血樣保存溫度和時間的不同,會使丙氨酸氨基轉移酶(ALT)測定值有不同程度的變化。本文就在不同時間、不同溫度下保存血液標本對ALT檢測結果的影響進行探討,以期找到適合集中化檢測工作中送檢機構血樣保存條件,避免ALT測定結果受到影響,確保臨床用血安全,同時避免血液浪費。
1 材料與方法
1.1 標本來源 隨機選擇經健康詢問,自述無繼往病史,ALT快速檢驗合格的健康獻血者血液標本40份, EDTANa抗凝,無溶血,無乳糜。
1.2 儀器與試劑 日立7600010全自動生化分析儀(日本);和光ALT測定試劑盒(日本);久保田8100型離心機(日本);4℃冰箱(日本三洋),-20℃、-80℃冰柜(青島海爾)。
1.3 方法 將40份標本隨機分成4組,每組10份,立即測得ALT的初始值,然后離心分離上層血漿,分別檢測25℃、4℃、-20℃、-80℃條件下保存2 h、4 h、6 h、24 h、2 d、3 d、4 d、5 d血漿中的ALT值。
1.4 統計學分析 計量資料以±s表示,采用t檢驗,P<0.05,為差異有統計學意義。
2 結果
不同溫度下分離保存的血漿ALT檢測結果,見表1。采用單因素方差分析各溫度組保存時間對ALT活性的影響,見表2。
3 討論
ALT是人體內促進氨基酸和α酮酸氨基轉移的酶之一,存在于心、肝、骨骼肌和腎等器官,血清中含量很少,而肝細胞內ALT含量最高,為血漿的數百倍,當肝細胞損害時,大量的ALT滲入血漿中,使血液內的ALT顯著升高,故ALT是肝臟功能診斷的重要指標之一,已被衛生部指定為采供血機構對供血者初篩和血液復檢的常規檢測項目[1]。ALT活性依賴于體溫、pH值、電解質平衡等諸多要素的影響,一旦脫離了人體環境,其活性必然會漸漸喪失,本實驗ALT活性總體呈逐步下降趨勢,由實表1 不同溫度下分離保存的血漿ALT檢測結果表2 單因素方差分析各溫度組保存時間對ALT活性的影響。驗可見不同溫度條件下,不同時間保存的血液標本ALT活性平均下降率不同。統計分析結果顯示,血漿標本在25℃與-20℃保存,對ALT活性影響顯著,而在4℃和-80℃保存ALT活性無顯著變化。如果 5 d內能夠實施集中檢測,送檢單位常常保存和運送全血標本,25℃保存的全血標本中細菌很易繁殖并產生大量代謝產物,導致紅細胞破裂溶血,由于紅細胞內ALT活性遠遠高于血清(漿),所以會導致ALT檢測結果升高,必然會導致因ALT不合格血液報廢率上升,除了放置溫度對ALT影響較大外,放置時間對ALT活性影響也較大,隨著時間的延長,血細胞對葡萄糖的酵解作用也會加劇,在酵解過程中會不斷產生丙酮酸,丙酮酸作為ALT檢測反應的中間產物,其值的高低直接影響ALT測定結果。因此,建議送檢單位5 d內檢測的血液標本在4℃條件下保存,而長時間保存的標本需分離出血漿部分,-80℃以下冷凍保存,而且應注意運送標本過程中保持低溫冷鏈運輸。
【參考文獻】
1 中華人民共和國國家標準獻血者健康檢查要求.GB 184672001.