霉菌的培養和觀察

（一）?實驗材料?        根霉，毛霉，黑曲霉，青霉，土豆瓊脂培養基，培養皿，載玻片，蓋玻片，鑷子，顯微鏡，小刀，U形管等。?（二）?實驗步驟?          1、配置培養基：根據原料用量配置土豆培養基。配置時，先急火煮沸，在溫火加熱20min，若有渾濁出現，則需過濾，然后定容。包扎土豆培養基，甘油等其他用品。滅菌后取出備用2、培養小室準備及滅菌?在培養皿底部鋪一張略小于皿底的圓形濾紙片，濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片，蓋上皿蓋，牛皮紙包扎，于恒溫干燥箱中121℃滅菌30min烘干備用；         2、瓊脂薄片制作：a)?將稍微冷卻的培養基，倒在培養皿 中，做成薄平板。培養基應該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。b)?用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大于1cm的瓊脂薄片c)?用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上（一個載玻片上方兩塊薄片）          3、取菌接種：用接種環挑取少量待觀察的霉菌孢子（霉菌菌種的表面輕輕刮取即可），接種于固體培養基邊緣，以便于霉菌生長。接種時只要將帶菌的接種環在載玻片上輕輕碰幾下即可。接種量要少，以免培養后菌絲過于稠密而影響觀察。          4、加蓋玻片：用無菌鑷子將皿內的蓋玻片蓋在瓊脂薄層上，用鑷子輕壓蓋玻片，使蓋玻片和載玻片之間的距離相當接近，但不能壓扁。蓋玻片不能緊貼載玻片，要彼此留有小縫隙，一是為了通氣，二是使各部分結構平行排列，易于觀察。         5、倒保濕劑：每皿倒入約2-3mL?20%的經滅菌處理的甘油，使皿內濾紙完全濕潤，以保持皿內濕度，蓋上皿蓋。制成載玻片濕室。         6、正置培養：將平皿置于27℃霉菌培養箱中培養一周。         7、觀察：?將培養好的載玻片取出，置于顯微鏡下直接觀察。?（三）實驗結果及分析?實驗結果?1.根霉：菌絲無隔，有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗，其頂端膨大成孢子囊，底部為半球形囊軸。2.毛霉：孢囊梗直接由菌絲出，頂端為球形孢子囊?3.黑曲霉：菌絲有隔，氣生菌絲分化為分生孢子梗（無隔），頂端 膨脹為球狀頂囊。4.青霉：菌絲有隔，分生孢子梗頂端不膨大，無頂囊，多次分枝成幾輪小梗，小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。