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  • 發布時間:2023-03-13 15:22 原文鏈接: 霍亂弧菌檢測的檢查過程

      (1)、增菌

      稱取檢樣25g,加入裝有225mL堿性蛋白胨水(APW)的廣口瓶內。固體樣品應以均質器9000r/min-10000r/min打碎,或以剪刀充分剪碎。(36±1)℃培養6h-8h和16h-24h。

      如為牡蠣樣品,應同樣制備另一份檢樣,置于APW中,42℃培養6h-8h和16h-24h。

      (2)、分離

      以3mm-5mm接種環取6h-8h和16h-24h增菌培養液的表面生長物一環分別劃線家終于TCBS瓊脂平板至少各一個,于(36±1)℃培養18-24h。

      在TCBS瓊脂上,典型的霍亂弧菌菌落為大的,光滑,黃色,稍平,具有不透明中心和半透明的邊緣。

      (3)、初步鑒定

      ① 用接種環挑取TCBS瓊脂平板上2-5個可疑菌落,劃線于T1N1瓊脂平板上,(36±1)℃培養12h-18h。

      ② 以無菌白色濾紙沾取T1N1瓊脂表面培養物,滴加氧化酶試劑進行氧化酶試驗。

      ③ 以無菌環取氧化酶陽性的培養物于0.5%去氧膽酸鈉液試劑滴中,進行粘絲試驗。

      ④ 以接種針取氧化酶和粘絲試驗陽性的培養物,接種TSI、KIA和AGS,穿刺底層并劃線斜面。

      ⑤ 以接種針取上項相同培養物接種T1N0和T1N3肉湯。

      ⑥ 將TSI、KIA、AGS、T1N0和T1N3肉湯于(36±1)℃培養18h-24h。

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