實驗方法原理 NAE將α－乙酸萘酚水解，產生α－萘酚，再與重氮鹽偶聯，生成不溶性的有色沉淀位于胞質中。
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液α－乙酸萘酚加重氮鹽甲基綠水港派
實驗步驟
一、 實驗試劑：
1. 作用液：l／20mol／L 磷酸鹽緩沖液（PH7.4）40mg加10g／Lα－乙酸萘酚（以50％丙酮做溶劑）0.8ml，充分振蕩，直至最初產生的混濁物大部分消失為止，加重氮鹽，（堅牢藍B或其他種均可）40mg振蕩，過濾后使用．
2. 1g／L甲基綠水港派
二、 實驗操作：
l. 固定新鮮涂片置10％甲醛生理鹽水固定5min
2. 流水沖洗5min
3. 加入37℃作用液中1小時
4. 水洗
5. lg/L甲基綠水溶液復染5min
6. 水洗，干后鏡檢．
NaF抑制試驗：方法同上，在 40ml作用液中加入氟化鈉（NaF）6mg（每毫升作用液加NaF－l.5mg），若陽性明顯減弱或呈陰性，示被NaF抑制最好能計算NaF抑制率，其公式為：
（加NaF后NSE積分值/未加NaF時的NSE積分值）×100％凡抑制率＞50％者，提示確受NaF所抑．四. 實驗判定結果：細胞質內有灰黑色或棕黑色彌漫性或顆粒狀沉淀為陽性，胞質內無沉淀者為陰性．
收起
其他
1. 標本必須新鮮，應于取材后兩天內染色，否則酶的活性顯著降低．若冰箱內保存，可適當延長保存時間．
2. 重氮鹽的選擇，以堅固藍B．堅固藍RR及堅固黑B重氮鹽的染色為好．