非競爭性抑制是指有些抑制物往往與酶的非活性部位相結合,形成抑制物一酶的絡合物后會進一步再與底物結合;或是酶與底物結合成底物一一酶絡合物后,其中有部分再與抑制物結合。雖然底物、抑制物和酶的結合無競爭性,但兩者與酶結合所形成的中間絡合物不能直接生成產物,導致了酶催化反應速率的降低,這種抑制稱為非競爭性抑制。