飼料中鹽酸克倫特羅的檢測

方案優勢     

鹽酸克倫特羅做HPLC 分析時不需要衍生， 利用β-腎上腺素能激動劑分子可與C18 或C8 固定相分子相互作用，應用反相柱檢測β-激動劑類物質，具有檢測精密度高，專屬性強，假陽性低的優點。             

采用標準     

NY438-2001《飼料中鹽酸克倫特羅

方法/原理/步驟     

色譜條件 色譜柱：Hitachi LaChrom C18(5μm) 4.6mmI.D.x150mmL 柱 溫：30℃ 流速：1.0 mL/min 檢測波長：243nm 進樣量：15μL 流動相： 0.05%磷酸水溶液：乙腈=89：11 ? 標準溶液制備 準確稱取一定量鹽酸克倫特羅標樣于10ml容量瓶，用甲醇超聲溶解并定容，作為貯備液；稀釋成濃度為2μg/ml的標準品溶液，用0.45μm濾膜過濾，進樣測定。 ? 樣品溶液制備 1、 稱取約5g飼料樣品于100mL三角瓶中，準確加入100ml提取液（0.5%偏磷酸溶液：甲醇=80:20）， 超聲提取15min后振搖15s，靜置，取上清液于離心管中，4000轉/分鐘離心10min；用0.45μm濾膜過濾，進樣測定。 2、 凈化：移取離心過上清液10ml，置150ml分液漏斗中滴加2M氫氧化鈉溶液，充分振搖，調pH=11~12，分別加30、25ml乙醚萃取兩次，醚層通過無水硫酸鈉干燥，并用乙醚定容至50ml。準確移取25ml于50ml燒杯中，置通風櫥內，50℃水浴蒸干，殘渣用2ml 0.02M鹽酸溶解后，置SPE小柱上，分別用1ml含2%氨水的5%甲醇水溶液和含2%氨水的30%甲醇水溶液淋洗，最后用甲醇洗脫，洗脫液45℃氮氣吹干，殘渣中再加入2ml 0.02M鹽酸超聲溶解，用0.45μm濾膜過濾，進樣測定。         

儀器設備     

儀器

1)四元梯度泵PM1110

2)自動進樣器PM1210

3)柱溫箱PM1310

4)紫外檢測器PM1410

5) PM色譜工作站。           

實驗結果     

1、標樣測定

根據NY438-2001的色譜條件進行測定，得到的鹽酸克倫特羅的峰形很好，因此選擇該比例進行實驗，出峰時間為12.62min，圖1為鹽酸克倫特羅標樣的色譜圖。

　　圖1鹽酸克倫特羅標樣色譜圖

2、重復性實驗

對鹽酸克倫特羅標準溶液重復進樣6次，6針峰面積的相對標準偏差為0.07%，重現性很好，結果見下表

　　表1鹽酸克倫特羅標樣6針峰面積的重現性

3、飼料樣品檢測

某豬飼料樣品經前處理后測定，在12.62min未檢測到鹽酸克倫特羅殘留，實驗結果見圖2。

　　圖2飼料樣品與加標樣品重疊色譜圖

結論

采用日立Primaide高效液相色譜儀四元梯度配紫外檢測器，準確測定了違禁藥物鹽酸克倫特羅的含量。在上述色譜條件下，可以使被測樣品中各峰很好的分離，重現性良好。對飼料樣品中該項目進行了檢測，未檢測到鹽酸克倫特羅殘留，方法簡便實用，專屬性好，適用于常規限量檢測。