色譜條件
色譜柱：Hitachi-Inertsil ODS(5μm) 4.6mmI.D.x250mmL
柱溫：40℃
流速：1.0 mL/min
檢測波長：285nm
進樣量：10μL
流動相：甲醇
溶液制備
準確稱取一定量α-生育酚和dl-α-生育酚乙酸酯標準品于10ml容量瓶，用甲醇溶解并定容，作為貯備液，然后稀釋得到濃度為5μg/ml的標準品溶液，用0.45μm濾膜過濾，進樣測定。
稱取5g飼料樣品于100mL棕色具塞錐形瓶中，準確加入50ml乙醇，磁力攪拌30min后靜置，取上清液于離心管中，2000轉/分鐘離心5min，用0.45μm濾膜過濾，進樣測定。
儀器
1)四元梯度泵PM1110
2)自動進樣器PM1210
3)柱溫箱PM1310
4)紫外檢測器PM1410
5) PM色譜工作站。
1、標樣測定
根據上述色譜條件，得到α-生育酚和dl-α-生育酚的色譜圖，并且二者得到良好的分離，圖1為生育酚標樣的色譜圖。
圖1生育酚標樣色譜圖
2、線性相關性
對生育酚標準品貯備液逐級稀釋，配置一系列線性溶液，分別進樣測定；實驗結果表明α-生育酚和dl-α-生育酚醋酸酯在1～500μg/ml濃度范圍內線性關系良好，結果見下圖：
圖2生育酚線性關系圖
圖3 dl-α-生育酚醋酸酯線性關系圖
3、飼料樣品檢測
某飼料樣品經前處理后測定，檢測到α-生育酚和dl-α-生育酚醋酸酯，檢測結果見圖4。
圖4飼料樣品色譜圖
采用日立Primaide高效液相色譜儀四元梯度配紫外檢測器，準確地測定了維生素E的含量，在上述色譜條件下和雜質得到很好的分離，該方法線性關系良好。方法簡便實用，紫外檢測器靈敏度高，適用于常規限量檢測。