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  • 發布時間:2022-10-04 11:16 原文鏈接: 骨橋蛋白的基因結構

      OPN人的OPN基因定位在染色體4q13,是單一編碼基因,8kb大小,具有7個外顯子和6個內含子組成。小鼠位于5號染色體上,基因長約7Kb,包括7個外顯子,其5’端有啟動子序列,該啟動子中IKb長度也被測序并用GCG程序分析了轉錄因子的可能識別部位,這些轉錄因子包括API-5、PEA-3、PEA-1、Ets等。

      OPN基因結構的變異性較大。OPN本身是多等位基因,在小鼠有3個等位基因,人類至少有2個等位基因。通過比較分析,發現盡管不同種屬甚至同一種屬不同組織的OPN基因具有一定的多態性,其總體核苷酸序列還是呈中度保守性,其中編碼N末端和C末端以及含RGD序列的50個氨基酸區具有高度序列保守性。

      OPN啟動子包括1個TATA盒(-28-22)、1個顛倒的CCAAT盒(-55-50)及1個GC盒及多種轉錄因子的結合位點。API結合部位是高度保守的增強子樣元件。OPN基因啟動子上含有多個應答元件,如VitD反應元件,糖皮質激素反應元件,Ras反應元件,激活蛋白(AP)21結合位點等。

      離心脫脂后的牛乳,采用離子交換層析,疏水層析,透析等生物化學技術進行分離純化,然后對分離純化得到的產物進行SDS-PAGE電泳,免疫印跡技術初步鑒定,得到相對分子量約為60kDa,具有活性的骨橋蛋白。主要闡述牛乳中骨橋蛋白的分離純化及初步鑒定的方法,為骨橋蛋白功能性質的研究奠定了基礎。

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