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  • 發布時間:2019-05-07 17:37 原文鏈接: 骨髓巨核細胞計數

    1. 實驗原理

    用瑞氏染色法,對制備好的骨髓片進行染色,低倍鏡下(必要時轉油鏡確認)以37.5px×75px為單位面積,計數巨核細胞數,并加以分類。

    2. 標本采集:

    2.1 骨髓穿刺部分:一般取胸骨、棘突、髂骨前、嵴或后嵴等部分,兩歲以內小兒主張用脛骨穿刺。穿刺部分不同,取材可能有明顯的差異,必要時可做多部位取材,以便能得到更準確的分析數據。

    2.2 骨髓采集量:一般不超過0.2ml,否則易于稀釋。

    2.3 骨髓取材滿意的幾項指標:

    2.3.1 抽取骨髓時,患者有特殊酸痛感。

    2.3.2 骨髓涂片應有骨髓小粒。

    2.3.3

    顯微鏡下可見骨髓特有細胞成分,如巨核細胞、漿細胞、網狀細胞、組織嗜堿細胞、幼稚紅細胞、幼稚粒細胞等。

    3. 標本儲存:取材后應立即推制成骨髓薄片,并盡快送檢。

    4. 標本運輸:保持干燥,室溫運輸。

    5. 標本拒收的標準:重度血稀,無骨髓特有細胞成份標本。

    6. 實驗材料:瑞氏血細胞染色液,生產廠家:(臺資)珠海貝索生物技術有限公司。

    7. 實驗儀器:

    7.1 儀器名稱: OLYMPUS 顯微鏡

    7.2 儀器廠家:北京普利生公司骨髓細胞分析軟件系統

    7.3 儀器型號:OLYMPUS CH30

    8.

    操作步驟:

    8.1 骨髓片瑞氏染色:將制好的干燥骨髓涂片平置于染色架上,滴加瑞氏染色液A3-5滴使其迅速蓋滿骨髓膜,然后加瑞氏染色B3-5滴,輕輕搖動玻片或用洗耳球吹氣使AB染液充分混勻,染色1-2分鐘(氣溫低或涂片較厚時可適當延長染色時間),用自來水沖去染液,待干。

    8.2 巨核細胞計數:將瑞氏染色干燥后的骨髓片,用低倍鏡計數巨核細胞,并按原始巨核細胞、幼稚巨核細胞、顆粒型巨核細胞、產板型巨核細胞、裸核型巨核細胞分類記錄,計數面積以37.5px×75px為一單位面積。

    9. 質量控制:30份樣本,抽兩份樣本進行室內工作人員比對分析,要求差異在10%以內。

    10. 臨床意義:

    10.1 參考值:巨核細胞參考值7-35個∕37.5px×75px面積。分類:原始巨核細胞0,幼稚巨核細胞0-0.05,顆粒型巨核細胞0.10-0.27,產板型巨核細胞0.44-0.60,裸核型巨核細胞0.08-0.30

    10.2 原始巨核細胞增多見于巨核細胞白血病(M7),幼稚型巨核細胞比例增多見于特發性血小板減少性紫癲的急性型,顆粒型巨核細胞增多比例增多見于特發性血小板減少性紫癲的慢性型。巨核細胞減少見于巨核細胞系統再生障礙及某些白血病。

    11. 變異的潛在來源

    11.1 取材不當,骨髓成份被血液稀釋。

    11.2 涂片過厚或過薄,影響巨核細胞計數。

    11.3 低倍鏡下漏數小巨核細胞。

    12. 操作注意事項:

    12.1 骨髓取材禁忌癥:血友病、嚴重凝血因子缺乏癥。

    12.1 取材量不能過多,一般不超過0.2ml,以防血稀。

    12.3 取材后,必須立即涂片,因骨髓液中纖維蛋白原含量高,會很快凝固,影響涂片。

    12.4 推好的髓片應在空氣中搖動,使其盡快干燥,以免細胞變形。

    12.5 根據髓膜厚薄,細胞量多少及室內溫度等把握好染色時間,使染色效果滿意。

    12.6 鏡檢時循序檢查切勿漏檢,必要時用油鏡確認。

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