幾種可能性:
你的水相和有機相是怎么混合的?不要用在線排氣,人為混合,然后減壓抽濾之后再試一試。
這根柱子的粒徑是多少。長度是10cm,那么粒徑呢?是5um?還是3.5um或是更小?粒徑很小的柱子就不能開太大流速。柱壓高不說,也沒有必要。
甲醇是不是干凈?你的波長太低了。190nm的波長,甲醇已經有吸收了。這樣對要不你就用乙腈進行試驗,要不你就用好一點的甲醇。比如Fisher或者默克的色譜級甲醇再試一下。