高效液相色譜儀的紫外可見光檢測器解析

高效液相色譜儀的紫外可見光檢測器是基于 Lambert-Beer 定律，根據被測組分對紫外光或可見光具有吸收，且吸收強度與組分濃度成正比的關系進行檢測。很多有機分子都具紫外或可見光吸收基團，有較強的紫外或可見光吸收能力，因此紫外可見光檢測器靈敏度較高，應用廣泛。由于紫外可見光檢測器對環境溫度、流速和流動相組成等變化不是很敏感，能用于梯度淋洗。紫外可見光檢測器檢測方式有直接紫外檢測、間接紫外檢測和柱后衍生化光度檢測等。

一、直接紫外檢測：

所使用的流動相為在檢測波長下無紫外吸收的溶劑，檢測器直接測定被測組分的紫外吸收強度。

多數情況下采用直接紫外檢測。

二、間接紫外檢測：

使用具有紫外吸收的溶液作為流動相，間接檢測無紫外吸收的組分。

在離子色譜中使用較多，如以具有紫外吸收的鄰苯二甲酸氫鉀溶液作為陰離子分離的流動相，當無紫外吸收的無機陰離子被洗脫到流動相中時，會使流動相的紫外吸收減小。

三、柱后衍生化光度檢測：

對于可以與顯色劑反應生成有色配合物的組分（過渡金屬離子和氨基酸等），可以在組分從色譜柱中洗脫出來之后與合適的顯色劑反應，在可見光區檢測生成的有色配合物。

使用紫外可見光檢測器檢測時，為了得到高的靈敏度，常選擇被測組分能產生最大吸收的波長作為檢測波長，但為了選擇性或其它目的也可適當降低靈敏度而選擇吸收稍弱的波長。另外，應盡可能選擇在檢測波長下沒有背景吸收的流動相。