一、方法原理
環境空氣中苯并[a]芘用超細玻璃或石英纖維濾膜收集，二氯甲烷或乙腈萃取，濃縮純化，高效液相色譜分離，熒光檢測器檢測，保留時間定性，外標法定量。
二、試劑和材料
除非另有說明在分析中使用符合國家標準的分析純試劑實驗用水是新制備的超純水或蒸餾水。
乙腈（CH3CN）：高效液相色譜純。
正己烷(C6H14)：經高效液相色譜純化.
二氯甲烷（CH2Cl2）：高效液相色譜純。
無水硫酸鈉(Na2SO4)：在馬弗爐使用前加熱4小時。4小時，冷卻，密封，儲存在玻璃瓶中。
二氯甲烷正己烷混合液：3+7即用。
苯并[A]PYRene標準儲備液：40=100，g·mL，溶劑為乙腈，直接采購許可標準品溶液，參照標準品溶液證書保存。
苯并[a]芘標準中間體：ρ=10.0μg/ml。
將1.0 0ml苯并[a]芘標準貯存液準確地除去到10 ml瓶中，體積固定，與乙腈混合。儲存期為1年。
苯并[A]Pyrene的標準品溶液為：0．00～2．00，g·ml～（-1）。
準確轉移1.00毫升苯并[a]芘標準中間體至5毫升容量瓶中，用乙腈稀釋，混勻。密封在4℃以下，避光冷藏6個月。
過濾膜對0.3μm標準顆粒的截留效率不小于99％，過濾膜在400℃的馬弗爐內加熱5小時以上，冷卻后儲存在過濾膜盒內，取樣前和取樣后過濾膜不被污染，取樣前處于平坦狀態。
硅膠固相萃取柱：1000mg/6ml，也可根據雜質含量選擇合適容量的商用固相萃取柱。
有機相針式過濾器：13mm，0.45μm，聚四氟乙烯或尼龍濾膜。
三、儀器和設備
高效液相色譜法：具有熒光檢測器和梯度洗脫功能。
色譜柱：4.6mm至250mm，采用ODS-C18（十八烷基硅烷鍵合硅膠）柱或其他類似色譜柱，填料為5.0。mM
采樣器：滿足hj93或HJ/T 374對采樣器的要求大流量采樣器工作點流量為1.05m\179；/min；中流量采樣器工作點流量為100L/min；小流量采樣器工作點流量為16.67L/min..
萃取設備：低頻超聲波清洗機、索氏萃取機或性能類似的加壓流體萃取機。
濃縮設備：氮氣分布器、K-D濃度計或其他等效設備。
凈化裝置：固相萃取裝置。
一般實驗室儀器和設備。
四、樣品
樣品采集
環境空氣采樣點的布設應符合HJ 194的要求，無組織排放監測點的布設應符合HJ/T 55的要求；采集顆粒物的采樣時間、頻率和粒徑應符合相關標準的規定。
采樣時，用無鋸齒鉗將濾膜放入干凈的濾膜中，濾膜表面朝向進氣方向，濾膜被緊密壓縮將濾膜夾放入采樣器中，設定采樣時間等參數，啟動采樣器開始采樣。采樣結束后，用鑷子取出濾膜，將濾塵向內折疊，避免濾塵表面觸及無塵邊，放入收納盒中..
樣品保存
樣品采集后，濾膜密封避光保存迅速送回實驗室20℃下2個月內完成提取；制備好的樣品4℃避光保存，30天內完成分析。
試樣的制備
樣品提取
超聲波提取
除去濾膜邊緣無粉塵部分后，將濾膜分成N等份，將其中1份粉碎，放入塞瓶中，加入適量二氯甲烷超聲提取15min，用無水硫酸鈉干燥，轉移至濃縮瓶中，反復提取三次，合并提取液，濃縮純化一般情況下，整個直徑為9cm的濾膜每次需要加入35ml的萃取溶劑。
用乙腈萃取濾膜，將碎濾膜放入10 ml瓶塞中，用5.0ml乙腈準確提取15 min。提取液經有機相針狀濾池過濾后，丟棄初始液體，將濾液收集到樣品瓶中進行檢測。
索氏提取
將濾膜放入索氏萃取器，加入100 ml二氯甲烷，提取時間為16h，回流時間不少于5次/h。萃取后，冷卻至室溫，取出底瓶，清洗萃取杯接口，將清洗液轉移至底瓶。提取液用無水硫酸鈉干燥后轉移至濃縮瓶中濃縮純化..
自動索氏提取
將濾膜放入自動索氏提取器中加入100毫升二氯甲烷回流提取至少40個循環。萃取后，冷卻至室溫，取出底瓶，清洗萃取杯接口，將清洗液轉移至底瓶。提取液用無水硫酸鈉干燥后轉移至濃縮瓶中濃縮純化..
加壓流體萃取
將過濾膜置于加壓流體提取槽中，將萃取溫度設定為100℃，壓力為1500Psi2000Psi，靜態萃取為5分鐘，二氯甲烷的洗脫體積為池中體積的60％，氮氣被吹掃60s，靜態萃取至少兩次提取物用無水硫酸鈉干燥，轉移到濃縮瓶中進行濃縮和純化。
樣品濃縮
在富集裝置中，二氯甲烷樣品萃取液濃縮到45°C以下。溶劑完全轉化為正己烷，濃縮為1ml，純化；如果不需要進一步凈化，溶劑可轉化為乙腈，恒定體積為1.0毫升，并轉移到樣品瓶進行測試。
樣品凈化
硅膠固相萃取柱固定在凈化裝置上柱床依次用4毫升二氯甲烷和10毫升正己烷清洗.柱填充正己烷后，流量控制閥關閉.經過5 min的潤濕后，控制閥打開，流出液被丟棄。當液位略高于柱床時，將濃縮的樣品提取液移入柱內，用1.0ml二氯甲烷正己烷混合液洗滌樣品瓶兩次，將洗滌液一起移入柱內，接收出水，用8.0ml二氯甲烷正己烷混合液洗脫，洗滌液流經凈化塔后，關閉流量控制閥，浸泡5分鐘，然后打開控制閥，連接收集洗脫液，直到洗脫液完全流出。
將洗脫液濃縮后，將溶劑轉化為乙腈，轉化為1.0ml，轉移到樣品瓶中進行檢測。
五、分析步驟
高效液相色譜儀參考條件
柱溫35℃；進樣量10μL；熒光檢測器激發波長（λEx）/發射波長（λEM）：305nm/430nm。
流動相A：乙腈；流動相B：水。
標準曲線的建立
取適量苯并[a]芘標準溶液，用乙腈稀釋，制成標準系列。質量濃度分別為0.025μg/ml、0.050μg/ml、0.100μg/ml、0.500μg/ml、1.00μg/ml和2.00μg/ml。
將標準系列的溶液依次注入高效液相色譜(HPLC)中，并根據儀器的參考條件進行分離和檢測。得到了不同濃度的苯并[A]Pyrene的色譜圖以濃度為橫坐標，相應的峰高（或峰面積）為縱坐標繪制標準曲線
試樣測定
按與標準曲線相同的儀器條件測定樣品，記錄色譜峰的保留時間和峰高或峰面積當樣品濃度超過標準曲線的線性范圍時，用乙腈稀釋，然后測量。