酵母是單細胞真菌,它可以將糖發酵成酒精和二氧化碳,常被人們作為發酵劑,可用于釀造生產。為了研究酵母的品質和安全性,實驗人員也會開展各種檢測實驗,但在此之前,實驗人員會對酵母進行研磨,以便提取其中的DNA/RNA,以條形酵母為例,它是將酵母通過小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的,其研磨過程主要有:
1.首先,將有1mm的篩子扣入到裝有10-20ml球狀酵母的50ml破碎罐的頂部,經過離心破碎變成了2L的條狀物。壓力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐內,條狀可以在-80℃下被保存。
2.然后,將不銹鋼破碎罐、破碎球和裝有條狀酵母的器皿放入到用聚苯乙烯盒子盛放液體氮中,當預冷凍過程結束后,原來沸騰的液體氮恢復平靜將破碎罐從池中取出,并要將破碎罐沾有的液體全部清理干凈,以避免在破碎過程中發生爆炸。破碎罐、破碎球和器皿最好用有把手的煤氣鉗或坩鍋鉗拿取,而且通常要帶經過冷凍的手套。
3.再將破碎球和條狀酵母移入破碎罐中。罐中裝有一半的條狀酵母,易碎的條狀酵母被破碎球預冷凍的抹刀破碎,酵母的數量不要超過破碎罐體積的1/3,否則破碎的效率就會變得很底下。
4.然后將破碎罐蓋緊,在安裝在高通量組織研磨儀之前將破碎罐再次放入到液體氮中幾秒鐘,然后將破碎罐夾緊。
5.破碎次數為5次,每次3分鐘,功率為30hz。在每次破碎后都要將破碎罐取下,放入到裝有液體氮的水池中。當水池沸騰后,破碎可以繼續進行。所需樣本最后可以得到,而且也通過顯微鏡可以看到有價值的破碎過程。
6.經過15分鐘的破碎后,我們發現90%的酵母已經達到破碎效果。
7.剩余的殘渣被回收到50ml的器皿中以備后用或貯存。然后用一種具有永磁性的磁鐵把破碎球從殘渣中吸出回收。
8.最后,將高通量組織研磨儀的破碎罐和破碎球可以用溫的乙醇清洗,放到干燥處保存。
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