摘要: 橢圓葉花錨的主要活性成分為口山酮類化合物，這類化合物具有利膽、抗炎、抗菌及抗病毒活性。應用高速逆流色譜法建立了2 種高純度口山酮苷元的分離制備方法。對橢圓葉花錨氯仿萃取部位運用高速逆流色譜分離純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水( 5∶ 5∶ 7∶ 5，v /v /v /v) 為兩相溶劑系統，上相為固定相，下相為流動相。在主機轉速800r /min，流動相流速1. 5 mL/min，檢測波長254 nm 條件下進行分離制備。所得產物經高效液相色譜分析檢測，其化學結構由核磁共振氫譜( 1H NMR) 和核磁共振碳譜( 13C NMR) 鑒定。在此條件下，從100 mg 粗樣品中一步分離得到18 mg 1-羥基-2，3，5-三甲氧基口山酮， 14 mg 1-羥基-2，3，4，5-四甲氧基口山酮。經高效液相色譜分析，其純度均達98%以上。該方法簡便、快速，所得產物純度高，適合于橢圓葉花錨口山酮苷元的制備分離。
橢圓葉花錨( Halenia elliptica ) 系龍膽科( Gentianaceae) 花錨屬( Halenia) 植物，是藏藥中治療肝膽系統疾病的常用藥物之一［1］。臨床上，橢圓葉花錨多用于治療小兒急性黃疸肝炎和小兒急性乙型肝炎，療效顯著［2，3］。已有研究表明，橢圓葉花錨中口山酮苷類物質具有抗肝炎的作用［4］，但其生物活性則主要是通過轉化為口山酮苷元產生［5］。目前，有關橢圓葉花錨口山酮成分分離的研究報道大多采用傳統柱色譜方法［6 － 10］，存在樣品組分損失、玷污、變性、失活、拖尾，分離困難，收率低等不足。高速逆流色譜( high-speed couter-current chromatography，HSCCC) 是一種不使用固態支撐體或載體的液液分配色譜技術。其克服了固相載體對樣品的吸附而產生的損失、變性等缺點，并可以在短時間內實現高效制備性分離，因而在植物有效成分的分離與制備方面得到了廣泛的應用［11 － 13］。本研究采用HSCCC技術對橢圓葉花錨中口山酮苷元成分進行了分離制備與純化，得到兩種高純度的口山酮苷元( 1-羥基-2，3，5-三甲氧基口山酮( I) 和1-羥基-2，3，4，5-四甲氧基口山酮( II) ) ，為其進一步藥用開發研究提供技術支撐。