試劑、試劑盒 甜菜堿dNTP 溶液二甲基亞砜四甲基砜Taq 酶和酶緩沖引物
儀器、耗材 PCR 儀
實驗步驟
一、材料
1. 試劑
甜菜堿（Sigma 公司）
dNTP 溶液（含四種 dNTP, 每種 25 mmol/L)
二甲基亞砜（DMSO)(Sigma 公司）
四甲基砜（Sigma 公司）
2. 酶和酶緩沖液
Taq 酶
Taq 酶緩沖液（Taq 酶制造商提供）
3. 核酸和寡核苷酸
人類基因組 DNA，每個反應中 20ng，
hRF3(hGSPTl) 引物：hRF3f CCGC/CTCT/GTCG/TCGT/CGC
hRF3r CCGC/GCTG/AGGT/TCTC/CC
Klotho 外顯子 la 引物：klolaf CTCG/CAGG/TAAT/TATT/GCCAG
klolar GATG/GACG/CACC/CTTG
Klotho 外顯子 lc 引物：klolcf GTGC/AGCC/CGTG/GTCAC
klolcr GACT/CAGT/TCCC/ACAC/TTC
4. 設備
PCR 儀
5. 其他
瓊脂糖凝肢電泳所需設備和試劑
二、方法
1. 在滅菌的 0.2 ml 的 PCR 管中加入下列試劑。
基因組 DNA 20ng
引物（每種） 15pmol
Taq 酶 0.5U
10 x buffer 2.5ul
dNTP 溶液（含四種 dNTP) 250umol/L
加 H20 到 25ul
根據處理條件的不同，分別包含 DMSO(5%)、甜菜堿（lmol/L)、甜菜堿（2mol/L)、甜菜堿（lmol/L) 和 DMS0(5%)、甜菜堿（2mol/L) 和 DMS0(5%)、四甲基砜(0.4mol/L)，對照不加任何其他試劑。
2. 采用下列程序 A 或 B 運行 30 個循環。