HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統分離,再用熒光檢測器測定。與其配套的柱后衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離,其凈化效果優異。
該法能準確地分離不同種類的黃曲霉素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),檢測速度快且定性與定量準確,檢測限低,可作為仲裁法使用,但儀器設備價格昂貴,前處理方法相對繁瑣,若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加,對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。