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    RTPCR、QPCR、RealtimePCR、realtimeRTPCR你真的區分的開嗎?

    多少同學能將 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR區分開?有多少同學還在犯暈?今兒這貼,師兄就帶你區分區分,撥開那扇 PCR 迷霧。什么是 RT-PCR?RT-PCR就是逆轉錄 PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA,再以此為模板通過PCR進行 DNA擴增。了解更多:RT-PCR原理與實驗技術、RT-PCR技術概述、PCR/RT-PCR疑難問題解答那什么是 qPCR、Real-time-PCR?其實 Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一碼事,都是實時定量PCR,指的是PCR過程中每個循環都有數據的實時記錄,因此可以對起始模板數......閱讀全文

    一文讀懂分子診斷常用技術

      基于分子構象的分子診斷技術  (一)變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)與單鏈構象多態性(single strand conformation polymorphism,SSCP)  1970~1980年間,Fischer等

    盤點:分子診斷常用技術50年的沿革與進步

      一、基于分子雜交的分子診斷技術  上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年,由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增,人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現,為基于分子雜交的體外診斷方法進行了

    一文讀懂分子診斷技術、PCR技術、基因測序技術

      四、定量PCR(quantitative PCR,qPCR)  相比于其他分子診斷檢測技術,qPCR具有2項優勢,即核酸擴增和檢測在同一個封閉體系中通過熒光信號進行,杜絕了PCR后開蓋處理所帶來擴增產物的污染;同時通過動態監測熒光信號,可對低拷貝模板進行定量。正是由于上述技術優勢,qPCR已經成

    實時熒光定量PCR

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在許多

    臨床檢驗科常見設備和主要供應商大全

    臨床檢驗常見設備包括:一、臨檢設備:血細胞分析儀、流式細胞儀、血凝分析儀、尿液干化學分析儀、尿液有形成分分析儀、糞便分析儀二、生化免疫設備:生化分析儀、化學發光免疫分析儀、酶免疫分析儀、熒光免疫分析儀三、分子診斷設備:核酸提取儀、實時熒光PCR儀、基因測序儀、質譜儀四、微生物檢驗設備:微生物鑒定藥敏

    數字PCR應用及前景

     剖析|你想要知道的數字PCR應用及前景 一. PCR的發展歷史 PCR技術自問世以來,在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用。代 PCR在進行擴增后通過凝膠電泳進行定性分析。 隨著生物分子熒光技術的發展,1992年實時熒光定量P

    數字PCR應用及前景

    一. PCR的發展歷史 PCR技術自問世以來,在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用。第一代 PCR在進行擴增后通過凝膠電泳進行定性分析。 隨著生物分子熒光技術的發展,1992年實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR

    你想要知道的數字PCR應用及前景

     一. PCR的發展歷史  PCR技術自問世以來,在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用。第一代 PCR在進行擴增后通過凝膠電泳進行定性分析。  隨著生物分子熒光技術的發展,1992年實時熒光定量PCR(Quantitative

    QPCR常見問題及其分析

    一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為10

    PCR Array——基因表達分析疾病和信號通路的利器(一)

    以前只要提到基因表達分析,人們就會想到熒光定量PCR;只要提到高通量基因表達分析,人們會首先想到基因芯片。雖然熒光定量PCR儀幾乎每個實驗室都有,但是做芯片就不一定每個實驗室都具備這個條件了。那么只有一臺熒光定量PCR儀是否也能進行高通量的基因表達譜分析呢?QIAGEN 推出的RT2 Profile

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    如何做好熒光定量PCR實驗

    熒光定量PCR實驗指南一、基本步驟:1、目的基因(DNA和mRNA)的查找和比對;2、引物、探針的設計;3、引物探針的合成;4、反應體系的配制;5、反應條件的設定;6、反應體系和條件的優化;7、熒光曲線和數據分析;8、標準品的制備;二、技術關鍵:1、 目的基因(DNA和mRNA)的查找和比

    奧然生物推出新型冠狀病毒快速檢測qPCR一體機

    找到病原體是研發用于臨床和基本檢測所需的診斷試劑的前提,而體外診斷可以加快確定新病原與疾病的關系。在傳染病疫情爆發過程中,在發熱門診、傳染病區和隔離病區中,醫生可以利用體外診斷儀器簡便、迅捷地在患者身邊進行各項檢驗,并快速得到結果。新型冠狀病毒(nCoV)是一種此前從未在人體中發現的新病毒,武漢的新

    阪崎腸桿菌及實時熒光定量PCR檢測

    一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥,死亡率高達50% 以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健康危

    miRNA的qPCR檢測

    測序技術的引入促使miRNA研究領域進入快速發展階段,然而qPCR仍是驗證測序數據的重要標準。本文將為您介紹使用qPCR進行miRNA分析的基本要點,希望能幫助新人快速入門。什么是miRNA?miRNA是一類小的非編碼RNA,能夠與RNA誘導沉默復合物(RISC)結合,通過作用于mRNA,進而介導轉

    qPCR 和 Crystal dPCR 進行復雜生物樣本DNA/RNA絕對定量的比較

    復雜生物樣本(含PCR抑制劑)中DNA/RNA絕對定量的解決方案: Crystal dPCR更耐受抑制劑dPCR和qPCR(Real-time PCR)技術定量檢測DNA/RNA時抑制劑的影響對比眾所周知,數以千種的化學物質會抑制PCR反應有作用,而生物樣本往往都會含有類似的化合物,在DNA/RNA

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    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

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    Figure 1: epMotion 5073l worktable for qPCR setup Results and DiscussionThe automation of the qPCR setup using the 10 μL dispensing tool a

    一文匯總新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測專家共識

      突發新型冠狀病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)肺炎疫情以來,感染病例快速上升。隨著疫情的發展和防控力度加大,全國各地乃至境外均有病例報道[1,2,3,4],及時對急重癥及疑似患者進行診斷需要快速有效的方法,病毒核酸檢測可為診斷提供直接證據[5,6]。核酸檢測

    QPCR的基礎知識

    問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymerase C

    QPCR的基礎知識問答

    問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymerase C

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    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在

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    Real-time PCR實驗注意事項實驗中的一些好習慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均移液槍用完之后要歸到zui大計量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關水浴箱,切記切記多和大家討論,同時多關注別人討論的經驗,這幾乎是zui快提高的捷徑了所有的試劑都自己配,出了問題才好

    microRNA RT-PCR實驗方法介紹

      Stem-loop實時定量RT PCR   傳統實時定量RT PCR只能檢測到miRNA前體,而Stem-loop實時定量RT PCR技術可以解決這一問題。Stem loop實時定量RT PCR是一項高特異度、敏感度的檢測miRNA表達的實驗技術,包括設計具有莖環(stem loop)結構的

    microRNA RT-PCR實驗方法

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    一步法超級熒光定量PCR試劑盒(探針)說明

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    PCR技術盤點

      PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:模板DNA的變性,模板DNA與引物的退火(復性),引物的延伸。重復循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鐘, 2~3小

    干貨丨新冠病毒Nanopore測序標準操作流程

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