[用途]
分離支原體。
[配法]
牛心(去脂絞碎)250g，氯化鈉5g,胰蛋白酶(不含乳糖)2.5g，蛋白胨10g,酵母浸膏1g，瓊脂粉14g，蒸餾水1L。
⑴ 牛心消化液配制：取去脂絞碎牛心250g，氯化鈉5g及蒸餾水900m1混合；另取胰蛋白酶2.5g，溶解于100ml 5g/L
氯化鈉溶液中，然后與上述牛心消化液混合，放置50~60℃水溫箱內消化2h，中間不斷攪拌，消化后用兩層紗布過濾，濾液煮沸5min，用濾紙過濾后，補足水分至原量，然后加酵母浸膏1g，混勻，冷卻后調pH至8.0，分裝后121℃滅菌15min備用。
⑵ 支原體基礎瓊脂：取上述牛心消化液(已加氯化鈉)lL，加蛋白胨10g和瓊脂粉14g，混合后，加熱溶解，調pH至7.8~8.0，再加熱煮沸，用脫脂棉或絨布過濾，過濾后分裝于圓瓶中，每瓶70m1，121℃滅菌15min，備用。
⑶ 250g/L鮮酵母液制備:
食用鮮酵母塊250g，加蒸餾水1L，混合后，煮沸2min，用濾紙過濾，濾后置4℃冰箱中過夜，使之沉淀，次日吸取上清液，用150g/L氫氧化鈉溶液調pH至8.0，再煮沸1次，冷卻后，3000r／min離心45min，吸取上清液，分裝于瓶中，121℃滅菌15min，放4℃冰箱中備用，可保存3月。
⑷
傾注平板：溶解基礎瓊脂，冷卻至80℃左右，每瓶（70ml）內立即加預溫在37℃培養箱內的無菌馬血清或小牛血清20m1，250g/L鮮酵母浸出液10ml，10g/L乙酸鉈溶液2.5m1，青霉素G鉀鹽溶液(20萬U／m1)0.5m1和兩性霉素B溶液(5mg/ml)0.1m1；充分混勻后傾注9cm平板，經37℃培養過夜，無菌試驗陰性者，存放4℃冰箱備用。
注：
⑴ 乙酸鉈是極毒藥品，須特別注意安全操作。
⑵ 支原體美藍瓊脂平皿為分離肺炎支原體的選擇性平皿，口腔、唾液分泌物中的其它支原體均被抑制生長，肺炎支原體生長為“桑椹狀”無色的菌落。
⑶
支原體傳代、移種用0.1%半固體瓊脂，配制時除用0.1%瓊脂粉外，其它成分與支原體基礎培養基相同，但不加兩性霉素，此半固體瓊脂分裝在試管內滅菌備用。傳代時將平皿上已選定的支原體菌落用無菌刀片切下一小塊，直接移種于半固體管中，置適當的氣體環境中，培養3~5天后，可在瓊脂小塊出現“小島狀”絮片生長物，或呈顆粒狀，即次代支原體。
⑷ 支原體傳代用液體培養基：其成分與上述支原體半固體瓊脂相同，不加瓊脂粉和兩性霉素B。