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熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。另外，CFSE標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。熒光探針CFSE進入細胞后定位于細胞膜、細胞質和細胞核，在細胞核的熒光染色最強，并證實CFSE不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準確和更安全的得到想要的實驗數據。CFSE：羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3......閱讀全文
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
做細胞實驗的親們，經常需要對細胞的活性進行驗證，如何知道自己研究的細胞是否還活著，活性怎么樣? PCR、抗體IHC染色等細胞分析方法進行活性檢測，由于只能反映某個時間點的細胞行為而具有局限性。當傳統細胞分析方法無法獲得預期結果時，使用實時細胞分析方法通常會得到很多新的生物學發現，因此活細胞分析技
1.檢測細胞代謝活性檢測細胞的代謝活性也可以反映細胞增殖的情況。在細胞增殖過程中乳酸脫氫酶的活性會增加，而活性的脫氫酶可以使得外源性的四唑鹽或者阿爾瑪藍(Alamar blue)還原成為帶有顏色還原產物。通過分光光度計或者酶標儀來讀取含染料培養基的吸光度，從而衡量細胞的代謝活性，檢測細胞增殖的情
基 本 方 案 淋 巴 細 胞 的 CFSE 標記材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)實驗動物，人外周血或者培養的淋巴細胞VPBS, pH7. 4H a n k s 平 衡 鹽 溶 液（H B S S ) p H 7. 4含 5 % (V /V ) 熱 滅 活 F B S 的 P B S5m m
2、流式細胞標記法 （1）PE-mAb/FITC-annexin V 熒光標記法 正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加
實驗步驟基 本 方 案 淋 巴 細 胞 的 CFSE 標記材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)實驗動物，人外周血或者培養的淋巴細胞VPBS, pH7. 4H a n k s 平 衡 鹽 溶 液（H B S S ) p H 7. 4含 5 % (V /V ) 熱 滅 活 F B S 的 P B S
做細胞實驗的親們，經常需要對細胞的活性進行驗證，如何知道自己研究的細胞是否還活著，活性怎么樣? PCR、抗體IHC染色等細胞分析方法進行活性檢測，由于只能反映某個時間點的細胞行為而具有局限性。當傳統細胞分析方法無法獲得預期結果時，使用實時細胞分析方法通常會得到很多新的生物學發現，因此活細胞分析技
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）滲入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的堿基，也是DNA合成的必需物質。用同位素3H標記TdR即3H-TdR作為DNA合成的前體能摻入DAN合成代謝過程，通過測定細胞的放射性強度，可以反映細胞DAN的代謝及細胞增殖情況。但是具有放射性。 二、M
核酸插入染料溴化乙錠(EtBr) 和碘化丙啶（PI）能夠結合到DNA雙螺旋的大溝。4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）和Hoechst染料（有幾種常用的）則結合小溝。請注意， 一些染料 (例如碘化丙啶)也會結合到RNA發卡結構形成的溝中，因此如果要做DNA定量，需要用染料和RNA
Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用實驗材料和方法 從1968年 zui早的商品化 流式細胞術(FC) 和熒光激活細胞分類術(FACS)誕生以來,