凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。......閱讀全文
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。 瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
雙向凝膠電泳技術
雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上分開。近年來經過多方面改進已成為研究蛋白質組的最有使用價值的核心方法。 分離蛋白質組所有蛋白的兩個關鍵參數是其分辨率和可重復性。在目前情況下，
雙向凝膠電泳技術
雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上分開。近年來經過多方面改進已成為研究蛋白質組的最有使用價值的核心方法。分離蛋白質組所有蛋白的兩個關鍵參數是其分辨率和可重復性。在目前情況下，雙向凝膠電泳
雙向凝膠電泳技術
雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上分開。近年來經過多方面改進已成為研究蛋白質組的最有使用價值的核心方法。 分離蛋白質組所有蛋白的兩個關鍵參數是其分辨率和可重復性。在目前情況下，
凝膠電泳技術介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
變性梯度凝膠電泳技術的主要應用和技術特點
DGGE/TGGE已廣泛用于分析自然環境中細菌、藍細菌, 古菌、微型真核生物、真核生物和病毒群落的生物多樣性。這一技術能夠提供群落中優勢種類信息并同時分析多個樣品，具有可重復和操作簡單等特點, 適合于調查種群的時空變化, 并且可通過對條帶的序列分析或與特異性探針雜交分析鑒定群落組成。DGGE和TGG
雙向凝膠電泳技術的概念
雙向凝膠電泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年發明的，原理是第1向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，具有相同等電點的蛋白質無論其分子大小，在電場的作用下都會用聚焦在某一特定位置即等電點處；第2向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白
雙向凝膠電泳技術的原理
1、根據蛋白質的等電點（第一向）和分子量（第二向）的不同進行分離。2、電泳后根據蛋白質的上樣量對膠進行考馬斯亮蘭染色、銀染或熒光染色，然后用相關軟件對電泳圖象進行分析。
雙向凝膠電泳技術應用
凝膠中蛋白的檢測凝膠染色的目的是使其中的蛋白質能夠被觀察到。目前還沒有通用的染色方法，只能在考慮多種因素如需要的靈敏度、線性范圍、方便程度、費用、以及成像設備類型等基礎上，結合實際進行選擇。有時也可以將蛋白轉膜后通過免疫印跡的方法來進行檢測。圖像采集和分析成像設備可以攝人圖像，對凝膠圖像以數字形式保
變性梯度凝膠電泳技術的原理
雙鏈DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝膠電泳時，其遷移行為決定于其分子大小和電荷。不同長度的DNA 片段能夠被區分開，但同樣長度的DNA 片段在膠中的遷移行為一樣，因此不能被區分。DGGE/TGGE 技術在一般的聚丙烯酰胺凝膠基礎上，加入了變性劑（尿素和甲酰胺）梯度，從而能夠把同樣長度但序列不同的DN
雙向凝膠電泳技術的技術應用
凝膠中蛋白的檢測凝膠染色的目的是使其中的蛋白質能夠被觀察到。目前還沒有通用的染色方法，只能在考慮多種因素如需要的靈敏度、線性范圍、方便程度、費用、以及成像設備類型等基礎上，結合實際進行選擇。有時也可以將蛋白轉膜后通過免疫印跡的方法來進行檢測。圖像采集和分析成像設備可以攝人圖像，對凝膠圖像以數字形式保
雙向凝膠電泳技術的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳技術的技術缺陷
(1)低拷貝蛋白的鑒定。人體的微量蛋白往往還是重要的調節蛋白。除增加雙向凝膠電泳靈敏度的方法外，最有希望的還是把介質輔助的激光解吸/離子化質譜用到PVDF膜上，但當前的技術還不足以檢出拷貝數低于1000的蛋白質。(2)極酸或極堿蛋白的分離。(3)極大（>200kD）或極小（
瓊脂糖凝膠電泳技術
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，
雙向凝膠電泳技術應用于凝膠中蛋白的檢測
凝膠染色的目的是使其中的蛋白質能夠被觀察到。目前還沒有通用的染色方法，只能在考慮多種因素如需要的靈敏度、線性范圍、方便程度、費用、以及成像設備類型等基礎上，結合實際進行選擇。有時也可以將蛋白轉膜后通過免疫印跡的方法來進行檢測。
變性梯度凝膠電泳技術的技術原理
雙鏈DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝膠電泳時，其遷移行為決定于其分子大小和電荷。不同長度的DNA 片段能夠被區分開，但同樣長度的DNA 片段在膠中的遷移行為一樣，因此不能被區分。DGGE/TGGE 技術在一般的聚丙烯酰胺凝膠基礎上，加入了變性劑（尿素和甲酰胺）梯度，從而能夠把同樣長度但序列不同的DN
單細胞凝膠電泳技術的試驗步驟
試劑及材料：1）PBS2）0.8%正常熔點凝膠（PBS配制）3）0.6％低熔點凝膠（PBS配制）4）毛玻璃片5）蓋玻片6）堿性裂解液（2.5mol/L NaCl;100mmol/L Na2EDTA;10mmol/L Tris;1%肌氨酸鈉），臨用前加10％DNMSO，1％Triton X-1007）
雙向凝膠電泳技術的修飾和加工
蛋白質的翻譯后修飾和加工，是指在肽鏈合成完成后進行的化學反應，如磷酸化、羥基化、糖基化、二硫鍵形成，以及目前發現的蛋白質自剪接等等，可能有一百種以上。翻譯后修飾和加工對蛋白質的正常生理功能是必需的，它們的變化往往和疾病的發生有關。用雙向凝膠電泳可以進行翻譯后修飾的研究，如用32P標記可以研究磷酸
瓊脂糖凝膠電泳技術介紹
一、凝膠制備1.微波爐溶解瓊脂糖時，膠液沸騰沖溢出三角錐瓶微波爐加熱時膠液可能發生劇烈沸騰，1）總液體量不宜超過三角錐瓶的?50%?容量，2）2%?以上膠液設置中火加熱3）膠液劇烈沸騰時，停止加熱，移開三角錐瓶，請戴上防熱手套，小心搖動三角錐瓶，然后再次加熱，膠液沸騰直至膠液清澈，保證瓊脂糖完全溶解
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷，因此可以在
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷，因此可以在
瓊脂糖凝膠電泳技術概述
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續的p
毛細管凝膠電泳技術介紹
中文名稱毛細管凝膠電泳英文名稱capillary gel electrophoresis;CGE定 義將凝膠移到毛細管中作支持物進行的一種電泳。由于溶質分子體積不同，在起分子篩作用的聚合物內進行電泳時被分離。適用于生物大分子的分析及PCR產物分析。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術可應用于：(1)蛋白質的分離提純；（2）蛋白質組學研究。實驗方法原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，
變性梯度凝膠電泳技術的原理和應用
變性梯度凝膠電泳（denatured gradient gel electrophoresis，DGGE）最初是Lerman 等人于20 世紀80 年代初期發明的，起初主要用來檢測DNA 片段中的點突變。Muyzer 等人在1993 年首次將其應用于微生物群落結構研究 。后來又發展出其衍生技術，溫度
關于單細胞凝膠電泳技術的步驟介紹
1、單細胞凝膠電泳技術— 制備第一層膠：100ml 0.8%正常熔點膠，加蓋蓋玻片，4℃固化10min； 2、單細胞凝膠電泳技術—?制備第二層膠：輕輕地去除蓋玻片，在第一層膠上滴加75ul含1×10000個細胞的0.6%低熔點膠（cell與凝膠比例為1：5），加蓋蓋玻片，4℃固化10min；
變性梯度凝膠電泳技術的優缺點對比
DGGE 法的優缺點優點1、幾乎可以檢出所有突變2、可將突變分子完好無損地同野生型分子分開用于進一步的分析3、無須標記4、電泳前只需一步操作5、可用于未經擴增的基因組 DNA6、可檢測出象甲基化這樣的 DNA 修飾缺點1、需要專門設備需要用計算機對序列進行分析2、需要進行預實驗需要昂貴的“ GC 夾