4月王牌聚焦:紛紛擾擾的干細胞造假事件
2014年的四月天氣波動頻繁,一會兒艷陽高照,一會兒又烏云密布,氣溫驟降。生命科學界竟也是如此:干細胞研究一會兒報道稱獲得了突破性的重大成果,但沒高興幾天,作者就已經承認造假了,就連iPS技術鼻祖山中伸彌也來湊熱鬧…… 今年一月,日本理化研究所宣布,通過將皮膚等處的體細胞在弱酸性溶液中浸泡30分鐘左右的方法,成功地研制出了新型萬能細胞,這種萬能細胞可以生成人體的各種組織。這一研究技術與iPS細胞等技術不同,前者僅僅通過改變外部環境,給予細胞刺激,就能使細胞發生變化。 這一研究成果公布后引起了干細胞研究領域的轟動,甚至這一發現被認為能獲得諾貝爾獎。然而時隔幾個月,調查卻表明文章的主要作者小保方晴子處理或偽造了研究中的DNA片段圖像。 起初小保方晴子還表示沒有欺騙的意圖,論文中的一些問題不會影響結果,之前承認將她博士論文中的圖片用到了Nature論文中是無意地。并且雖然她 為論文中存在的錯誤多次道歉,但對自己的研究結果有信......閱讀全文
基因轉移技術
基因轉移技術分為兩類:第一類是將目的基因轉導入體外培養的細胞或導入從體內取出的細胞,觀察目的基因在細胞中的表達,這項技術稱基因轉染(gene transfection)技術。通常情況下,該技術轉入的目的基因不與細胞染色體發生整合,而是在細胞質呈現暫時性表達,隨時間推移而逐漸減弱或消失。第二類是將
基因敲除技術
一.概述:基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術,是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA?同源重組原理,用設計的同源片段替代靶基因片段,從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展,除了同源重組外,新的原理和技術也逐漸被應用,比較
基因敲除技術
一.概述:基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術,是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA 同源重組原理,用設計的同源片段替代靶基因片段,從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展,除了同源重組外,新的原理和技術也逐漸被應用,比較
基因重組應用——轉基因技術
基因重組中轉基因技術的理論基礎來源于進化論衍生來的分子生物學。基因片段的來源可以是提取特定生物體基因組中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重組DNA片段被轉入特定生物中,與其本身的基因組進行重組,再從重組體中進行數代的人工選育,從而獲得具有穩定表現特定的遺傳性狀的個體。該技
基因槍技術技術簡介
基因轉移技術是一種將外源基因以在體(in vivo)或離體(in vitro)的方式導入到靶細胞核內的技術, 屬于基因工程技術(亦稱重組DNA?技術)的一個重要組成部分。基因工程技術以分子生物學等學科發展為基礎, 使人類擁有了構造生物遺傳物質新組合的能力。對在體方式而言, 基因轉移技術需要跨越細胞外
轉基因技術的技術分類
植物轉基因技術植物轉基因技術是采用克隆等方式,在受體細胞中置入外源DNA,代表性的使用方式如載體介導法、DNA直接攝取法。動物轉基因技術顯微注射法就是利用玻璃針將DNA注入到動物胚胎細胞核,再將胚胎細胞移植到動物體,使其正常發育,是早期常用的動物轉基因技術。體細胞核移植法就是先在體外培養細胞,篩選優
轉基因技術的技術分類
植物轉基因技術植物轉基因技術是采用克隆等方式,在受體細胞中置入外源DNA,代表性的使用方式如載體介導法、DNA直接攝取法。動物轉基因技術顯微注射法就是利用玻璃針將DNA注入到動物胚胎細胞核,再將胚胎細胞移植到動物體,使其正常發育,是早期常用的動物轉基因技術。體細胞核移植法就是先在體外培養細胞,篩選優
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除(又稱不完全基因敲除)兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因擴增技術的技術特點
特異性高首次報導的PCR所用的DNA聚合酶是大腸桿菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃會變性失活,需每次PCR循環都要重新加入Klenow大片段,同時引物是在37℃延伸(聚合)易產生模板—引物之間的堿基錯配、致特異性較差,1988年Saiki等從溫泉水中分離到的水
基因敲除技術的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立,而最成熟的實驗動物是小鼠,對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來,牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊,基因敲除狗的培育難度大為增加,狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題,研究團隊設計了一個自體移植的策略,
基因敲除技術的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立,而最成熟的實驗動物是小鼠,對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來,牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊,基因敲除狗的培育難度大為增加,狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題,研究團隊設計了一個自體移植的策略,
轉基因技術的技術原理
轉基因技術是利用現代生物技術,將人們期望的目標基因,經過人工分離、重組后,導入并整合到生物體的基因組中,從而改善生物原有的性狀或賦予其新的優良性狀。除了轉入新的外源基因外,還可以通過轉基因技術對生物體基因的加工、敲除、屏蔽等方法改變生物體的遺傳特性,獲得人們希望得到的性狀。這一技術的主要過程包括外源
轉基因技術的技術特點
轉基因技術是將高產、抗逆、抗病蟲、提高營養品質等已知功能性狀的基因,通過現代科技手段轉入到目標生物體中,使受體生物在原有遺傳特性基礎上增加新的功能特性,獲得新的品種,生產新的產品 。自然界中同樣廣泛存在自發的轉基因現象,譬如植物界的異花授粉、天然雜交以及農桿菌天然轉基因系統等等。
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除(又稱不完全基因敲除)兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
轉基因技術的技術原理
轉基因技術的原理是將人工分離和修飾過的優質基因,導入到生物體基因組中,從而達到改造生物的目的。由于導入基因的表達,引起生物體的性狀,可遺傳的修飾改變,這一技術稱之為人工轉基因技術(Transgene technology)。 人工轉基因技術就是把一個生物體的基因轉移到另一個生物體DNA中的生物
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除(又稱不完全基因敲除)兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除(又稱不完全基因敲除)兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
轉基因技術的技術原理
轉基因技術是利用現代生物技術,將人們期望的目標基因,經過人工分離、重組后,導入并整合到生物體的基因組中,從而改善生物原有的性狀或賦予其新的優良性狀。除了轉入新的外源基因外,還可以通過轉基因技術對生物體基因的加工、敲除、屏蔽等方法改變生物體的遺傳特性,獲得人們希望得到的性狀。這一技術的主要過程包括外源
驚!歐法院裁定基因誘變技術為轉基因技術
位于盧森堡的歐洲法院近日裁定,包括基因編輯在內的基因誘變技術應被視為轉基因技術,因此使用不涉及在生物之間轉移基因的CRISPR等技術培育出來的植物,應接受歐盟轉基因相關法律的監管,必須經過與傳統轉基因植物同樣漫長的審批過程。圖片來源:MICHAEL GOTTSCHALK 這無疑是對包括科學家在
轉基因技術基因槍法簡介
利用火藥爆炸或高壓氣體加速(這一加速設備被稱為基因槍),將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中,然后通過細胞和組織培養技術,再生出植株,選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。與農桿菌轉化相比,基因槍法轉化的一個主要優點是不受受體植物范圍的限制。而且其載體質粒的構建
基因轉染技術介紹
用的基因轉染技術是將外源基因導入靶細胞需要一定的載體和導入方法,基因轉技術則是將純化的含有靶基因的質粒DNA送入細胞內,并在細胞內表達。轉染方法有多種,根據不同的細胞,貼壁或懸浮細所可選用不同的方法,其目的是要達到設置轉染效率,影響轉染產率的因素有多種,包括轉染方法、操作技術、質粒DNA的純度
基因技術專題1
專題一:RNA干擾技術(RNAi)1995年,康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現,反義和正義RNA都阻斷了基因的表達,他們對這個結果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究證明,在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中,真正起作用的是雙鏈RNA。這些
基因技術的原理
基因(遺傳因子)是遺傳的物質基礎,是DNA或RNA分子上具有遺傳信息的特定核苷酸序列。基因通過復制把遺傳信息傳遞給下一代,使后代出現與親代相似的性狀。人類大約有幾萬個基因,儲存著生命孕育、生長、凋亡過程的全部信息,通過復制、表達、修復,完成生命繁衍、細胞分裂和蛋白質合成等重要生理過程。生物體的生
“基因靶向”技術介紹
“基因靶向”技術,通常被稱作基因敲除,是指對一個結構已知但功能未知的基因,從分子水平上設計實驗,將該基因去除,或用其他相近基因取代,然后從整體上觀察實驗動物,推測相應基因的功能。
基因技術專題2
RNAi技術RNA干擾(RNA interference, RNAi)是近年來發現的研究生物體基因表達、調控與功能的一項嶄新技術,它利用了由小干擾RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物細胞內同源基因的特異性沉默(silencing)現象,其本質是siRNA與對應
基因測序技術原理
基因測序技術能鎖定個人病變基因,提前預防和治療。[2]?自上世紀90年代初,學界開始涉足“人類基因組計劃”。而傳統的測序方式是利用光學測序技術。用不同顏色的熒光標記四種不同的堿基,然后用激光光源去捕捉熒光信號從而獲得待測基因的序列信息。[2]?雖然這種方法檢測可靠,但是價格不菲也是有目共睹的,一臺儀
轉基因技術簡介
轉基因技術的理論基礎來源于進化論衍生來的分子生物學。基因片段的來源可以是提取特定生物體基因組中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被轉入特定生物中,與其本身的基因組進行重組,再從重組體中進行數代的人工選育,從而獲得具有穩定表現特定的遺傳性狀的個體。該技術可以使重組生物增
基因敲除技術簡介
動物實驗和實驗動物都要求達到實驗室操作規范(good laboratory practice, GLP)和標準操作程序(standard operating procedure, SOP)這些規范和操作對實驗動物和實驗室條件,工作人員素質,技術水平和操作方法都要求標準化。所有藥物的安全評價試
基因差異表達技術
真核生物中,從個體的生長、發育、衰老、死亡,到組織的得化、調亡以及細胞對各種生物、理化因子的應答,本質上都涉及基因的選擇性表達。高等生物大約有30000個不同的基因,但在生物體內任意8細胞中只有10%的基因的以表達,而這些基因的表達按特定的時間和空間順序有序地進行著,這種表達的方式即為基因的差異表達
基因捕獲技術介紹
基因捕獲技術是最具應用前景的基因克隆方法之一。利用該技術建立的隨機插入突變的突變體文庫,可用于尋找、鑒定和研究大量未知功能和已知功能的活化基因,它是繼自然突變、物理突變和化學突變之后發展起來的新的分子生物學方法。基因捕獲載體是帶有報告基因和/或選擇標記基因的不完整的基因表達載體;這些載體所帶的基因只