實驗技術:組織切片的制備
【目的】組織標本必須首先被制成組織切片,再經過染色處理,然后才能在顯微鏡下進行臨床診斷和科學研究。【原理】蘇木素染色結合伊紅染色是常規組織學染色技術,也稱為H & E染色。蘇木素是堿性染色,細胞核被染成深紫或蘭色,常用作核染色;伊紅是酸性染色,細胞漿染呈紅色,常用作胞漿染色。【材料】1.試劑和溶液(1)2-甲基丁醇(異戊醇)(2)干冰(3)O.C.T.(Tissue-Tek, SAKURA)(4)冰凍或石蠟組織塊(5)酸性Harris 蘇木素染料(6)1%酸性酒精70%酒精 99 ml濃鹽酸 1 ml(7)醇溶性伊紅染料(8)酒精(9)二甲苯(10)樹脂封片液2.設備(1)......閱讀全文
組織學——組織切片
·?????????Histological techniques?(William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques, like? fixation, dehydration, embedment and subs
冷凍組織切片制作
實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman 1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
組織切片Masson染色
Masson染色是利用兩到三種陰離子染色液對組織中的纖維和炎性因子著色的染色方法,染色后可使膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色,肌纖維、胞漿呈紅色,細胞核呈藍黑色 一、實驗用品 組織蠟塊、蘇木素染液、鹽酸酒精分化液、麗春紅酸性復紅液、苯胺藍染液、1%磷鉬酸、2%冰醋酸、0.2%冰醋酸、梯度乙醇、二甲
什么是組織切片
這是組織胚胎學和病理學檢查的一個專業稱呼。先通俗的解釋一下什么叫組織胚胎學和病理學檢。比如身上哪里長了包塊、硬結、疙瘩、痣,反正就是原來沒有,現在有了,而且不正常時,醫生就會建議切一點,或者用針穿刺一點用來做檢查,這個檢查就叫病理學檢查;而科學家為了研究動植物的微觀結構,比如想看看正常的皮膚細胞是長
冷凍組織切片的制作
實驗概要本實驗介紹了冷凍組織切片制作的基本操作流程。主要試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇主要設備載玻片,Whatm
組織病理實驗_冰凍切片
組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等
組織切片機切片背景過深的原因分析
原因分析:a.漂洗不夠;b.切片或涂片過厚;c.蛋白質封閉不夠或所用血清溶血d.使用全血清抗體稀釋不夠;e.底物成色反應過久;解決措施:對一些新的或少用的抗體顯色時進行監控,避免顯色時間過長。
組織切片機切片邊緣著色的原因分析
原因分析:a組織邊緣與玻片粘貼不牢,邊緣組織松脫漂浮在液體中,導致洗滌不徹底;b切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織,邊緣的試劑容易首先變干,濃度較中心組織高而致染色深。解決措施:組織的前期處理應規范,試劑要充分覆蓋組織,盡量避免選用壞死較多的組織。
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質,與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外,膠體金還可與其它多種生物大分子,如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒免疫金標記物儀器、耗材培養箱顯微鏡實驗步驟1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片
冷凍組織切片的制作實驗
實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman 1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
植物組織石蠟切片的制作
一、實驗目的 1.熟練掌握石蠟切片的方法。 2.掌握永久制片的制作過程,為研究植物的內部結構奠定基礎。 3.學會植物內部結構的比較研究方法。 二、實驗器具與 試劑1.器具 石蠟切片機、烘箱、顯微鏡、染色缸、小培養皿、鑷子、毛筆、吸水紙、紗布、載玻片、蓋玻
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理 利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質,與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外,膠體金還可與其它多種生物大分子,如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 免疫金標記物儀器、耗材 培養箱顯微鏡實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,
實驗技術:組織切片的制備
【目的】組織標本必須首先被制成組織切片,再經過染色處理,然后才能在顯微鏡下進行臨床診斷和科學研究。【原理】蘇木素染色結合伊紅染色是常規組織學染色技術,也稱為H & E染色。蘇木素是堿性染色,細胞核被染成深紫或蘭色,常用作核染色;伊紅是酸性染色,細胞漿染呈紅色,常用作胞漿染色。【材料】1.試劑和溶液(
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料?冰凍組織試劑、試劑盒?異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材?濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟?1.? 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2.? 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3.?
普通組織石蠟包埋切片步驟
1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒內。 2、脫水:將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. ?將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2. ?在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3. ?保證C
組織石蠟包埋和切片技術
包埋劑embedding?agent? 在制作切片或超薄切片時,由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質浸透組織內部,整個組織一樣硬化,以利于切成薄片,這種物質叫做包埋劑。一股用光學顯微鏡觀察的切片,用石蠟、火棉膠、炭蠟、明膠等作包埋劑;電子顯微鏡則
組織病理實驗_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。實驗
病理制片技術——組織石蠟切片
組織經石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現使用的切片機有平推式切片機、輪轉式切片機兩種。一、平推式切片機石蠟切片法1.切片前的準備:清洗過的載物片(或免清洗的),毛筆,鉛筆,小竹片,水槽,霧化器,攤片器,切片刀,刀架。2.切片制作步驟:刀架的粗削部放在頭端,在切片機
組織蠟塊切片的保存
許多實驗室研究人員習慣將組織蠟塊切片后長期保存在室溫條件下,而切片后的組織在室溫下長期保存抗原易損失。研究發現,切片在室溫下保存3個月以上,免疫組化染色結果會出現減弱或陰性,故進行了新、舊切片保存時間對照實驗。選擇11種不同組織蠟塊每例連續切10片,共110片,常溫空氣中放置1個月、3個月、6個月、
組織切片機所有切片呈陽性的原因分析
原因分析:a緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準確,洗滌不徹底;B使用已變色的呈色第五溶液,或呈色反應時間過長;C過氧化氫濃度過高,呈色反應過快且粘附劑太厚;D切片在染色過程中抗體過濃,或干片了;E抗體孵育時間過長。解決措施:縮短抗體孵育時間和呈色反應時長,染色過程中防止出現干片情況。
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容
組織切片機所有切片呈陰性的原因分析
原因分析:a.緩沖液內含疊氮化鈉,抑制酶的活性;b.染色未完全按照操作步驟進行;c.漏加一種抗體或抗體失活;d.復染或脫水劑使用不當;e.底物中加入的過氧化氫少或失活。解決措施:設立“陽性對照”。如果陽性對照有了表達,說明染色的全過程和所有試劑都沒有問題。如果此時測試片仍為陰性,便是真實的陰性,說明
LSCM組織的冷凍包埋和切片
組織的冷凍包埋和切片?組織的冷凍方法可根據固定和保存條件不同而不同,盡可能加快冷凍速度以力求減少組織在冷凍?過?程?中?冰晶?的?形?成?。組織冷凍后?,使用冷凍切片機,將組織切成?5 ~ 15?μm?的切片,粘貼于處理過的載玻片上,室溫干燥?1h?后,可進行免疫熒光抗體標記。或放入載玻片盒,- 8
冷凍組織及切片的準備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 新鮮的組織 試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰 磷酸鹽緩沖液(PBS
冷凍組織及切片的準備實驗
實驗材料 新鮮的組織試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰磷酸鹽緩沖液(PBS) Tek OCT 組織復合物儀器、耗材 封閉容器燒杯 恒冷裝置 解剖工具 平盤組織模子載玻片刀片實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液(PBS)Tek OCT 組織復合物(Sakura Finet
冷凍組織及切片的準備實驗
為了獲得較好的結果,應當用新鮮的組織,因為在-80°C 中保存超過 24 h 的樣品,其RNA 的產量和完整性將大打折扣。盡管有幾個實驗小組曾經報道用 LCM 技術從石蠟包埋的組織中獲得了沒有降解的 RNA, 但作者還是推薦使用冷凍的組織塊。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮
硬組織切片機的功能
1.頜骨軟硬組織聯合切片,種植體觀察等,包括能夠切割鮮活組織和顳下頜關節,上,下頜骨,有牙齒充填物的頜骨,帶種植體的頜骨,冠橋,牙齒等組織學標本。 2.骨科軟硬組織聯合切片,能夠切割鮮活組織和硬組織(股骨,髖關節,椎體),帶植入物(金屬,陶瓷,塑料,礦物質等)的骨組織學樣本等。 3.心血管支架切
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片是不需要固定的,冰凍切片新鮮取材后,應立刻放入冰凍切片機內切片。如不能立即切片,要放入液氮中速凍,然后放在-70度低溫冰箱內長期保存抗原性不會丟失。在手術臺上取下的組織放到冷凍機里面-20度左右凍成硬塊,制成切片用于快速診斷,該診斷僅作參考,應以石蠟診斷為主。
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存,也可直接凍存,直接凍存一般采取液氮中速凍,然后轉入-20度保存,凍存組織應避免反復凍融,且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉),影響形態學觀察。