實驗方法原理 Southern 雜交獲得的信號強度取決于若干因素,包括固定的 DNA 與探針互補的比例、探針的大小及特異活性以及轉移到膜上的基因組 DNA 的數量。在最佳條件下,這種方法的敏感度足以檢測到與 32P 標記的高度特異(>109 cpm/μg)的探針互補的 <0.1 pg 的 DNA。 實驗材料 固定于膜上的 DNA 無菌水配的 poly (A) RNA DNA 或 RNA 探針 鮭魚精 DNA 試劑、試劑盒 磷酸-SDS 洗液 預雜交......閱讀全文
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
一、Southern雜交 Southern雜交可用來檢測經限制性內切酶切割后的DNA片段中是否存在與探針同源的序列,它包括下列步驟: (1) 酶切DNA, 凝膠電泳分離各酶切片段,然后使DNA原位變性。 (2) 將DNA片段轉移到固體支持物(硝酸纖維素濾膜或尼龍膜)上。&
實驗概要本實驗介紹了動物細胞基因組DNA中小衛星多態性Southern blot檢測的原理和操作步驟。掌握核酸雜交檢測技術(Southern blotting技術)、核酸探針的標記技術、小衛星DNA多態性檢測分析技術(DNA 指紋圖譜技術)和化學發光檢測技術。實驗原理Southern印跡雜交技術包括
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
1.1.2.2 降落PCRTD-PCR是一種在一個反應管或少數幾個反應管中通過一系列退火溫度逐漸降低的反應循環來達到最佳擴增目的基因的PCR方案。它通過體系自身的代償功能彌補以反應體系和并非完美的循環參數所造成的不足。此策略保證了最初形成的引物模板雜交體具最強的特異性。盡管最后一些循環采
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
第一節 原位雜交組織化學概述 一、核酸分子雜交技術 1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究,其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,形成雜交的雙鏈。自此以后,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功,核酸自動
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息
四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧核糖核酸
分子雜交儀 Hybridization Oven根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。1、是用于大容量的分子雜交儀;2、用于Southern或者Northern技術點雜交的雜交儀;3、用于小容量的核酸雜交儀;4、微孔板原位雜交儀;5、載玻片原位雜交和平板雜交儀;6、Western雜交儀。原位分
實驗概要將待檢測的DNA樣品固定在固相載體上,與標記的核酸探針進行雜交,在與探針有同源序列的固相DNA的位置上顯示出雜交信號。通過Southern雜交可以判斷被檢測的DNA樣品中是否有與探針同源的片段以及該片段的長度。該項技術廣泛被應用在遺傳病檢測、DNA指紋分析和PCR產物判斷等研究中。但由于該技
分子雜交儀 Hybridization Oven 根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交儀; 2、用于Southern 或者 Northern技術點雜交的雜交儀; 3、用于小容量的核酸雜交儀; 4、微孔板原位雜交儀; 5、載玻片原位雜交
就根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交儀; 2、用于Southern 或者 Northern技術點雜交的雜交儀; 3、用于小容量的核酸雜交儀; 4、微孔板原位雜交儀; 5、載玻片原位雜交和平板雜交儀; 6、Western 雜交儀。 原位分子雜交,斑點
是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應用于腫瘤生物學、血液病理學、遺傳、微生物學、細胞和分子生物學、神經內分
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應
實驗原理核酸分子雜交技術是分子生物學領域中最常用的具體方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果,便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一
根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交儀; 2、用于Southern 或者 Northern技術點雜交的雜交儀; 3、用于小容量的核酸雜交儀; 4、微孔板原位雜交儀; 5、載玻片原位雜交和平板雜交儀; 6、Western 雜
根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交儀; 2、用于Southern 或者 Northern技術點雜交的雜交儀; 3、用于小容量的核酸雜交儀; 4、微孔板原位雜交儀; 5、載玻片原位雜交和平板雜交儀; 6、Western 雜
摘要:本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞:轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Genetically modifi
Southern 雜交是分子生物學的經典實驗方法。其基本原理是將待檢測的DNA樣品固定在固相載體上,與標記的核酸探針進行雜交,在與探針有同源序列的固相DNA的位置上顯示出雜交信號。通過Southern雜交可以判斷被檢測的DNA樣品中是否有與探針同源的片段以及該片段的長度。該項技術廣泛被應用在遺傳病
4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液 【配制方法】 在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調至pH值至7.0,用蒸餾水定容1ml,分裝成小份保存于-70℃ 5.10mol/L乙酸酰溶液 【配制方法】 把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1
(1) 定性PCR法定性PCR可直接檢測啟動子、終止子、標記基因片斷、目的基因片斷。為使目的基因很好的進行表達,在構建基因表達載體時常在目的基因的5’和3’端分別加上啟動子和終止子。當前大約75%的轉基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S啟動
實驗原理核酸分子雜交技術是分子生物學領域中zui常用的具體方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果,便可繪制出DNA分子的限制
摘要:本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞:轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Gen