親和層析實驗：常規方法
實驗步驟 一、親和介質的選擇 親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標，既保證較弱的非特異性吸附，又可以在整個過程中維持良好的流動特征。 優選介質應具備便宜、易獲取和使用簡便的特點。親和介質可以是商品化的, 或通過適當的化學作用將配基吸附在固相載體上(詳見本章第4節)。下文將詳細討論如何選擇合適的親和介質（GEHealthcare,2007;GustavssonandLarsson，2006;Zachariou，2007), 并對一些需要重點考慮的因素進行總結。 1.固相載體材料的基本特征 介質顆粒及孔隙應大小一致，且具有良好的流動性能。介質的表面積與孔隙呈負相關，這直接影響固定化配基數量，繼而影響載量。孔隙與排阻限......閱讀全文
親和層析實驗
可溶性抗原或膜結合抗原的分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
親和層析實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 TrisTSA裂解緩沖液脫氧膽酸鈉洗滌緩沖液三乙醇氨緩沖液儀器、耗材 層析柱離心管離心機實驗步驟 1. ?準備一支活化后被淬滅的Sepharose預柱（5 ml 柱床）和一支Ab-Spharose免疫親和層析柱，并將它們串聯起來。2. ?以冰冷TSA溶液重懸50 g 細
免疫親和層析實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 免疫親和介質 溴化氰（CNBr) 活化的 Sepharose 4B HCl 55% 飽和 AMS 沉淀物 偶聯緩沖液
親和層析的簡介
在生物分子中有些分子的特定結構部位能夠同其他分子相互識別并結合，如 酶與 底物的識別結合、受體與配體的識別結合、 抗體與 抗原的識別結合，這種結合既是特異的，又是可逆的， 改變條件可以使這種結合解除。生物分子間的這種結合能力稱為 親和力。親和層析就是根據這樣的原理設計的 蛋白質 分離純化方法。
親和層析凝膠指南
GE HealthcareBenzamidine Sepharose? 6B is p-aminobenzamidine covalentlyattached to Sepharose 6B by the epoxy coupling method.p-Aminobenzamidine (PAB),
免疫親和層析實驗
試劑、試劑盒免疫親和介質溴化氰（CNBr)活化的 Sepharose 4BHCl55% 飽和 AMS 沉淀物偶聯緩沖液乙醇胺緩沖液 BLAC 洗脫緩沖液二硫蘇糖醇硫氰酸鉀疊氮鈉儀器、耗材Econo-柱SDS-PAGE 電泳裝置實驗步驟材料與設備免疫親和介質（帶固定化的 MAb NT73; 見下文)溴
親和層析的原理
將一對能可逆結合和解離生物分子的一方作為配基（也稱為配體），與具有大孔徑、親水性的固相載體相偶聯、制成專一的親和吸附劑，再用此親和吸附劑填充色譜柱，當含有被分離物質的混合物隨著流動相流經色譜柱時，親和吸附劑上的配基就有選擇地吸附能與其結合的物質，而其他的蛋白質及雜質不被吸附，從色譜柱中流出，使用適當
親和層析技術
親和層析?????（一）原理????親和層析是一種吸附層析，抗原（或抗體）和相應的抗體（或抗原）發生特異性結合，而這種結合在一定的條件下又是可逆的。所以將抗原（或抗體）固相化后，就可以使存在液相中的相應抗體（或抗原）選擇性地結合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質分開，達到分離提純的目的。????
親和層析的應用
親和色譜的用途很廣泛，可以用來從細胞提取物中分離純化核酸、蛋白，還可以從血漿中分離抗體。分離重組蛋白就經常使用親和色譜。通過基因修飾為蛋白加上一些人為的特性，這些特性使蛋白選擇性地與配體結合，從而達到分離的目的。親和色譜的另一大用途是從血漿中分離抗體。
免疫親和層析實驗
試劑、試劑盒 免疫親和介質溴化氰（CNBr) 活化的 Sepharose 4BHCl55% 飽和 AMS 沉淀物偶聯緩沖液乙醇胺緩沖液 BLAC 洗脫緩沖液二硫蘇糖醇硫氰酸鉀疊氮鈉儀器、耗材 Econo-柱SDS-PAGE 電泳裝置實驗步驟 材料與設備免疫親和介質（帶固定化的 MAb NT73; 見