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  • 發布時間:2020-09-21 19:18 原文鏈接: 3M霉菌和酵母菌檢驗測試片操作以及判讀

      一、測試霉菌和酵母菌 操作方法

      1、未開封時,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期內用完,高溫度時,凝固水可以排除,包裝物最好于室溫啟開。

      2、已開封的,將封口以膠帶封緊。

      3、保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和溫度<50%,不要冷藏已開啟的包裝袋,并于一個月內使用完。

      4、制備1:10和更大稀釋的食物樣品稀釋液,稱取或吸取食物樣品,置入適宜的無菌容器內,如均質袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內。

      5、加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調PH7.2) 、0.1%的旦白膠水(ISO方法6887) 、緩沖旦白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水。不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,因為它們能抑止菌生長。

      6、攪拌或均質樣品.

      樣品不需要調PH,但已調解PH的樣品也能夠使用。

      7、將測試片置于平坦表面處,揭開上層膜。

      8、使用吸管將1ml樣液垂直滴加在測試片的中央處。

      9、允許使上層膜直接落下,切勿向下滾動上層膜.

      10、手拿壓板橫膜,將壓板放置在上層膜中央處.

      11、平穩的壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養面積上,切勿扭轉壓板。

      12、拿起壓板,靜置至少1分鐘以使培養基凝固。

      13、測試片的透明面朝上,可堆疊至20片,于21-25℃(70-77℉)培養3-5天。

      大的或快速生長的霉菌在培養5天后會呈現含混模糊的菌落,應在培養3天后記錄高數量計數結果。

      如果培養5天后,測試片上菌落叢生過快的生長,則以3天計數結果作為估計菌落數。培養時間和溫度因方法而有不同,最通用的認可方法是:

      AOAC官方方法997.02

      (食品類)

      21-25℃培養5天。

      14、可目視及用標準菌落計數器或其它的照明放大鏡計數,并可參考判讀卡計算菌落數。

      二、測試霉菌和酵母菌 判讀方法

      Petrifilm and Mold count MoldTM測試片為預先制備好的培養基系統,它含有一種冷水可溶性的凝膠劑,營養基和一種指示染劑,可提供對比,利于菌落計數。

      Yeasr count=44

      圖1為酵母菌菌落特征:

      小型菌落

      菌落有明顯的邊緣

      菌落為灰白色到蘭綠色,也可呈粉色

      菌落有隆起

      菌落顏色均勻一致,沒有暗色中心

      Mold count=27

      圖2為酶菌菌落特征:

      小型菌落

      大型菌落

      菌落有擴散的邊緣

      菌落有不同的顏色(以霉菌產生不同色素而定)如棕色.米色.橙色.和蘭綠色等.

      菌落扁平

      通常菌落中心顏色深暗

      Years and mold count=0

      圖3所示在PYM測試片上沒有霉菌和酵母菌菌落.

      Yeast count=12

      Mold count=4

      圖4所示在PYM測試片上有少數量的霉菌和酵母菌菌落.

      Estimated yeast count=480

      Mold count=21

      圓形的生長區大約為30cm2,當菌落數超過150個為估計菌落數,可選擇其中一個或幾個有代表性菌落的小方格(1cm2 ),計算平均菌落數在乘以30,可得到整個測試片上的估計菌落數.

      Yeast count=TNTC (實際菌數>104)

      圖6所示在PYM測試片邊緣框里光亮區的的小型.蘭色菌落同樣也分布在整個測試片中(盡管有較小的可見度),這是膠木菌菌落太多無法計數(TNTC)現象.

      Mold count=59

      圖7所示,在測試片上霉菌菌落出現堆擠和彼此覆蓋,為了方便計數,可將測試片分成幾個區域,計算每個有明顯暗色中心的菌落.所劃的方形區內有15個霉菌菌落。

      Mold count=TNTC

      圖8a和圖8b為同一樣品的測試結果.圖8a為1:10樣品稀釋液,菌落小、虛弱暗淡、數量多、計數困難。圖8b為1:100樣品稀釋液,生長菌落數在適宜范圍(15-150個)內,很容易計數。

      Yesat and Mold Count=0


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