【干貨】小談T載體
小談T載體 目前市場上TA克隆的種類繁多，各大廠家都推出自己各具特色的TA克隆試劑盒。對于科研工作者來說，這些TA克隆試劑盒之間有何區別？又該如何選擇適合自己的TA克隆？ 今天，小編就帶著這兩個問題來和大家一起了解一下。 T載體的定義 T載體（T-Vector）是一種高效克隆 PCR 產物（TA克隆）的專用質粒載體，為線性化載體，無需酶切可直接與具有A末端的PCR產物連接，屬于非定向克隆。 T載體的作用原理 大部分耐熱性DNA聚合酶進行PCR反應時都具有在PCR產 物的3’末端添加一個“A”的特性。因此，人們在線性化平末端載體的兩端分別又人工加上一個額外的T堿基，從而可與PCR克隆產物的A末端互補配對，提高了PCR產物連接和克隆的效率。 T載體的制備 ? 商業化T載體： 一般來說，商業化的T載體多是先使用平端限制性內切酶（如EcoRV）將克隆載體進行線性化，然后再單獨加入dTTP和Taq酶72～75℃反應，......閱讀全文
【干貨】小談T載體
小談T載體 目前市場上TA克隆的種類繁多，各大廠家都推出自己各具特色的TA克隆試劑盒。對于科研工作者來說，這些TA克隆試劑盒之間有何區別？又該如何選擇適合自己的TA克隆？ 今天，小編就帶著這兩個問題來和大家一起了解一下。 T載體的定義 T載體（T-Vector）是一種高效克隆 PCR 產
T載體的制作和應用
Also see?DNA Cloning§?????????Making TA Vector?(Crawford Lab)T-vectors are linear-blunt-ended plasmids with a few dT's added on by Taq polymerase.
EZT克隆載體介紹
EZ-T Simple載體環形圖和多克隆位點區序列EZ-T載體環形圖和多克隆位點區序列???EZ-T載體全序列信息1 CTGACGCGCC CTGTAGCGGC GCATTAAGCG CGGCGGGTGT GGTGGTTACG51 CGCAGCGTGA CCGCTACACT TGCCAGCGCC C
T載體的概念和應用
T載體是聚合酶鏈反應產物的克隆運載體，線性化后兩側3′端各多出一個脫氧胸苷酸(T)。由于PCR產物兩側3′端通常含單個脫氧腺苷酸(A)，與T載體之間的A-T互補性可提高PCR產物克隆的效率。
PCR產物的T載體克隆
（一）重組T質粒的構建一．原理外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組，這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的 DNA分子是在DNA連接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統中，將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌
T載體克隆的DNA序列分析
實驗目的： 了解常規DNA序列分析技術（Sanger雙脫氧法）的原理及操作步驟。 實驗原理： 在分子生物學研究中，DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等（1977）發明的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam和Gilbert（1977）發明的化學
常見的T載體及連接方法
T載體?是TA克隆載體的簡稱，就是利用載體的T末端和PCR產物的A末段連接而將目的基因克隆到載體中的方法。目前市場上常見的T載體?，根據連接方法可以分成兩種：方法1、以T4連接酶進行連接的方法，這種方法的載體?有P公司、T公司，可以說這兩家公司將這兩種方法發揮到了很高的水平，轉化子比較多，陽性率也不
關于T載體克隆的顯色反應介紹
LacZ基因是大腸桿菌乳糖操縱子中的一個基因，可以編碼β—半乳糖核苷酶。β—半乳糖核苷酶是由4個亞基組成的四聚體，可催化乳糖的水解．用X-Gal為底物進行染色時，呈藍色。 一些特定的質粒（比如pUC/pBS等），常帶有β—半乳糖核苷酶的調控序列和β—半乳糖核苷酶N端146個氨基酸（α肽段）的編
克隆化的PCR產物連入T載體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由 Taq DNA 聚合酶 PCR 擴增產生的帶 3' 突出端為 A 堿基的 DNA 片段能高效地克隆至 T 載體上，這種 T 載體有與 A 堿基互補的未配對 3' T 堿基（Holton and Graha
克隆化的PCR產物連入T載體
由 Taq DNA 聚合酶 PCR 擴增產生的帶 3' 突出端為 A 堿基的 DNA 片段能高效地克隆至 T 載體上，這種 T 載體有與 A 堿基互補的未配對 3' T 堿基（Holton and Graham 1991; Marchuk et al. 1991)。本實驗來源「分子克
克隆化的PCR產物連入T載體
實驗方法原理 由 Taq DNA 聚合酶 PCR 擴增產生的帶 3' 突出端為 A 堿基的 DNA 片段能高效地克隆至 T 載體上，這種 T 載體有與 A 堿基互補的未配對 3' T 堿基（Holton and Graham 1991; Marchuk et al. 1991
關于T載體克隆的基本信息介紹
重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下，有Mg2 、ATP存在的連接緩沖系統中，將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。 DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能，而且T4噬菌體DNA連接酶
pGEM?T載體的基本信息和質粒圖譜
pGEM?-T載體載體基本信息載體名稱pGEM?-T載體抗性Ampicillin載體長度3000 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpGEM?-T載體質粒圖譜
pGEM?T－Easy載體的基本信息和質粒圖譜
pGEM?-T Easy載體載體基本信息載體名稱pGEM?-T Easy載體抗性Ampicillin載體長度3015 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpGEM
pF1A－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pF1A T7載體載體基本信息載體名稱pF1A T7載體抗性Ampicillin載體長度3455 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpF1A T7載體質粒圖譜
pF25A－ICE－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pF25A ICE T7載體載體基本信息載體名稱pF25A ICE T7載體抗性Ampicillin載體長度3947 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpF25A ICE T7載體質粒圖譜
pFN18A－HaloTag?－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pFN18A HaloTag? T7載體載體基本信息載體名稱pFN18A HaloTag? T7載體抗性Ampicillin載體長度4377 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpFN18A HaloTag? T7載體質粒
pF1K－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pF1K T7載體載體基本信息載體名稱pF1K T7載體抗性Kanamycin載體長度3450 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega篩選標記Neomycin/G418(Geneticin)拷貝數High copy numberpF1K T7載體質粒圖譜
pF25K－ICE－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pF25K ICE T7載體載體基本信息載體名稱pF25K ICE T7載體抗性Kanamycin載體長度3942 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega篩選標記Neomycin/G418(Geneticin)拷貝數High copy numberpF25K I
pFN18K－HaloTag?－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pFN18K HaloTag? T7載體載體基本信息載體名稱pFN18K HaloTag? T7載體抗性Kanamycin載體長度4372 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega篩選標記Neomycin/G418(Geneticin)拷貝數High copy n
質粒載體的載體大小的介紹
大的質粒（大于15kb）不會很好轉化而且DNA產量通常很低。在設計實驗時要考慮到加入插入片段的最終載體大小，盡量用更小的載體。 兼容性 當多于一個質粒載體必須同時存在于同一個細菌細胞中，這兩個質粒的復制子必須是兼容的。當他們不能穩定地共存時，則認為這兩個質粒是不兼容的。 選擇/檢測插入片段
LITMUS39載體載體載體的基本信息和質粒圖譜
LITMUS39載體載體基本信息載體名稱LITMUS39載體抗性Ampicillin載體長度2817 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷貝數High copy number5'引物M13
微載體
實驗方法原理以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。實驗材料起始培養物儀器、耗材生長培養基微載體攪拌培養瓶磁力攪拌器實驗步驟1. 按照所需最終培養液量的 1/3，以 2~3 g/L 混懸微珠。2. 用胰蛋白酶消化和計數細胞，以正常接種濃度的 3~5 倍將細胞接種到微珠懸液中。3.
微載體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物
微載體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物
簡述慢病毒載體的載體質粒
載體質粒上HIV-1的順式序列通常包括兩端的LTR、剪切位點及包裝信號Ψ等。此外，研究表明，gag基因5′端的序列可提高載體RNA的包裝效率；Rev蛋白需要與Rev反應元件(RRE)相作用，將未剪切的載體轉錄產物從細胞核轉運到胞漿。因此，Naldini等在載體上保留了gag基因5′端350bp的
pFC20A－HaloTag?－T7－SP6載體的基本信息和質粒圖譜
pFC20A HaloTag? T7 SP6載體載體基本信息載體名稱pFC20A HaloTag? T7 SP6載體抗性Ampicillin載體長度4422 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpFC20A HaloTag
pFC30A－His6HaloTag?－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pFC30A His6HaloTag? T7載體載體基本信息載體名稱pFC30A His6HaloTag? T7載體抗性Ampicillin載體長度4312 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpFC30A His6Hal
pFN19A－HaloTag?－T7－SP6載體的基本信息和質粒圖譜
pFN19A HaloTag? T7 SP6載體載體基本信息載體名稱pFN19A HaloTag? T7 SP6載體抗性Ampicillin載體長度4428 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpFN19A HaloTag
pFN29A－His6HaloTag?－T7載體的基本信息和質粒圖譜
pFN29A His6HaloTag? T7載體載體基本信息載體名稱pFN29A His6HaloTag? T7載體抗性Ampicillin載體長度4398 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Promega拷貝數High copy numberpFN29A His6Hal