血細胞分析儀具有高效、快捷、重復性好等優點，已被各家臨床醫院廣泛應用，但應用中血小板計數時常出現假性血小板減少，令操作者真假難辨，相關報道甚少，本文就我院2006年中47例假性血小板減少原因分析如下：
1 對象與方法
1.1 研究對象
本院2006年門診及住院患者中47例血小板假性減少者，男27例，女20例。末梢血標本17例， EDTA-K2抗凝靜脈血標本30例。
1.2 儀器
美國庫爾特HMX血細胞分析儀及配套試劑。日本希森美康KX-21血細胞分析儀及配套試劑。日本OLYMPUS顯微鏡及草酸銨法血小板稀釋液。
1.3 方法
對47例假性血小板減少患者，根據全國血液學復檢專家小組指定的復檢標準，對于儀器計數血小板偏低、儀器有報警提示、散點圖及直方圖異常時，推片鏡檢血小板形態及分布情況；重新采血按《全國臨床檢驗操作規程》第3版要求進行顯微鏡下草酸銨法血小板復檢，計數3次取均值；末梢血預稀釋后，EDTA-K2抗凝靜脈血標本應放置室溫30 min充分混勻后進行血細胞分析。
2 結果
10例患者的末梢血標本，經顯微鏡下草酸銨法血小板計數結果得以糾正，同時血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察血小板形態及分布未見異常。
7例末梢血標本，10例EDTA-K2抗凝靜脈血標本經室溫30 min后進行血細胞分析及草酸銨法血小板計數結果均得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察血小板形態及分布未見異常。
8例EDTA-K2抗凝靜脈血標本經室溫30 min后進行血細胞分析結果仍然減少，草酸銨法血小板計數結果得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察發現血小板大小不等聚集團塊。
5例EDTA-K2抗凝靜脈血標本經室溫30 min后進行血細胞分析血小板計數結果仍然減少，草酸銨法血小板計數結果糾正，血涂片瑞氏染色后顯微鏡下觀察發現“血小板衛星現象”。
7例EDTA-K2抗凝靜脈血標本經室溫30 min后進行血細胞分析結果仍然減少，草酸銨法血小板計數結果得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察發現巨大血小板體積。
3 討論
10例末梢血標本假性血小板減少患者，多因穿刺組織損傷、組織凝血因子混入血標本中產生肉眼無法見到的凝塊[1]，是造成血細胞分析儀計數血小板假性減少的直接原因，對此類末梢血標本假性血小板減少患者，應該予以閱片，必須重新采血。
7例末梢血標本，10例EDTA-K2抗凝靜脈血標本經室溫30 min后進行血細胞分析得以糾正的患者，考慮血液離體后血小板產生可逆性聚集，使血小板計數結果偏低。末梢血標本經過預稀釋隨著與稀釋液作用時間延長血小板均勻離散，抗凝靜脈血標本中的EDTA-K2隨著放置時間延長亦能使血小板逐漸離散[2]，因此采取經室溫放置30 min充分混勻后進行血細胞分析可避免血小板假性減少的發生[3]。
8例血涂片瑞氏染色后顯微鏡下觀察發現血小板呈大小不等聚集團塊。此類患者多見于腫瘤、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥等一些不明原因產生凝集素，使EDTA-K2抗凝血中血小板聚集呈大小不等團塊，血細胞計數儀會把這些凝集團塊當作白細胞來計數，這樣血小板計數結果將假性減少，而白細胞數量增加；對于此類血小板減少一般儀器可有警報提示和散點圖、直方圖異常，庫爾特HMX血細胞分析儀會在WBC結果后面做出[*R]提示，WBC散點圖DF1、DF2圖像下方血小板區細胞分布密度向右延伸[4]，提示有血小板凝集的存在；希森美康KX-21血細胞分析儀會在WBC結果后面做出WL提示，WBC直方圖上Ghost區和SCR之間的鑒別線與直方圖交點抬高，提示有大顆粒存在。對此類患者采用草酸銨法血小板計數。
5例血涂片瑞氏染色后發現“血小板衛星現象”。“血小板衛星現象”是偶見于EDTA-K2抗凝血中，血小板黏附、圍繞于中性粒細胞（或偶爾黏附于單核細胞）的現象，系EDTA和白細胞表面的IgG或Fc片段相互作用、非特異性結合血小板表面的GPⅡb/Ⅲs所致，雖與疾病和藥物無關，這些黏附、圍繞于中性粒細胞的血小板被誤計為白細胞，造成血小板假性減少[5]，由于“血小板衛星現象”造成血小板減少，可造成儀器對白細胞分類不確切，應采取草酸銨法血小板計數糾正，有文獻報道用枸櫞酸鹽抗凝可消除此現象。
7例血涂片瑞氏染色后發現血小板體積偏大。這類患者多見于腫瘤、白血病、肝病。一般血細胞分析儀計數血小板閾值在2～30 fl，因此血小板體積大于30 fl時，超過儀器計數血小板閾值，不被納入血小板計數范圍，被誤認為是小紅細胞，因此是血小板計數結果偏低[6，7]，對此庫爾特HMX血細胞分析儀WBC散點圖DF1、DF2圖像下方血小板區細胞分布密度向右延伸[4]，MPV值增高，PLT直方圖底部分布較寬，提示有血小板凝集的存在；希森美康KX-21血細胞分析儀RBC結果后面出現RL、MPV值增高，PLT直方圖底部分布較寬，鑒別線與直方圖的交點抬高。此時應采用草酸胺法血小板計數糾正其結果。
綜上所述，根據全國血液學復檢專家小組制定的復檢標準，對于儀器計數患者血小板偏低時，儀器有報警提示、散點圖及直方圖異常，應及時推片鏡檢及采取草酸胺法血小板計數糾正其結果，避免假性血小板減少現象發生，以提高檢驗結果的準確性。