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    免疫組化染色方法大匯總

    免疫組化的方法很多,新方法層出不窮,如二步法,要不斷更新,與時俱進。雖然這些方法各有其特色,但總的來說,只要應用恰當均可獲得較為滿意的結果。方法的選擇并不是影響免疫組化結果的主要因素。問題在于一個單位應常規地、固定地使用一種方法,不宜交替使用不同的方法或經常更換方法。一旦選定一種方法,應務必使其標準化,力圖使一抗、二抗、標記試劑和底物的濃度、孵育時間和濃度、緩沖液的使用程序化、規范化。一、SP法免疫組化染色 原理 鏈霉素抗生物素蛋白(SA)是從鏈霉素中分離出的蛋白質,穿透組織的能力比ABC、PAP復合物大,反應速度快,它含有四個亞基,每個亞基都有與生物素(Biotin)連接的部位,且二者間有極強的親和力,SA的等電位接近于6.5,近中性,而卵白素(Avidin)為10,因此,SA幾乎不與組織中的內源性凝集樣物質發生非特異性結合,使用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶放大系統,即可產生低背景、高放大效果。S-P采用生物素標記的第二......閱讀全文

    單克隆抗體的制備(三)

    3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死,在無菌操作下取組織,放 在 4°C無血清培養基中,最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    PD-L1到底該如何檢測?

      在今年NCCN指南中明確提出對于無明確驅動基因突變的初診的晚期NSCLC肺癌患者可以進行PD-L1的檢測,如果PD-L1表達≥50%,初始治療可以選擇PD-1單抗Keytruda用藥。基于其較化療優越的臨床生存優勢及較少的不良反應。很多醫生及患者朋友們也意識到,一線使用Keytruda重點在篩查

    流式細胞技術基本原理應用和發展趨勢

    流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成

    SMAD2/3與TGF-β影響轉錄因子發生m6ARNA甲基化調控干細胞發育

      文章導讀:   胚胎干細胞作為一種全能性細胞,通過增殖和分化,產生動物體所有組織和器官的細胞。已有研究表明,胚胎干細胞發生m6A RNA甲基化,大多與細胞增殖[1-2],免疫應答[4]關系密切。然而,對于m6A修飾在胚胎干細胞向神經內胚層細胞分化過程中的分子機制目前并沒有相關報道。今天,分享一

    環狀RNA結合功能蛋白!找對方向20分文章水到渠成

      環狀RNA作為研究持續火熱的明星分子,不同于對其豐富的表達譜研究,環狀RNA功能機制研究還僅僅處在起步階段。環狀RNA研究多為miRNA海綿機制,部分circRNA可競爭性結合miRNA,解除miRNA對靶基因的抑制作用,上調靶基因的表達。其實,環狀RNA可以通過結合不同種類的功能蛋白,分別在轉

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