實驗方法原理溶解蛋白質,與染料混勻,l0min 后閱讀 O.D.。實驗步驟材料十二烷基硫酸鈉(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考馬斯亮藍 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸:將 100 mg 考馬斯藍溶于 50 ml 95% 乙醇,加人 100 ml 85% 磷酸;然后以 1L 水稀釋。蛋白質標準溶液(如 BSAlOpg/ml);設計實驗,然后間隔 1~2 個月,以 BSA 或相似的標準蛋白質(1 50ug/ml) 制作標準曲線。操作步驟1. 將蛋內質(1~20ug)或細胞(約 1X106) 溶于 100ul3.5 mmol/L SLS 或 0.3mol/L NaOH 中。2. 分別加人 100ul 試劑空白對照(SLS),100ul 受測蛋白質溶液,lOOul BSA 標準品,每個 3 管。3. 加人 lml ......閱讀全文
八十一、我使用的儀器是美析的AA-1800配置標準溶0.5ug/ml,1.0,1.5,2.0,ph值在1-1.7之間,用的硝酸,一次蒸餾水,可是吸收度總是上不去,相鄰的吸收度才0.015左右,數據間隔太小了,使用的普線是2138,狹縫為0.4,請問怎樣調整才能提高吸
原子吸收光譜儀是分析化學領域中一種極其重要的分析方法,但是很多用戶在使用過程中經常會遇到這樣或者那樣的問題,比如標準曲線的線性不好、數據不穩定、空白值較高、漂移很大等問題。 本文是原子吸收光譜儀在使用過程中經常遇到的200個問題及解決方案,這是廣大原子吸收光譜儀一線用戶的
色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。 1、網上對柱子是否可以反沖一直有爭論,那什么樣的柱子可以反沖,什么不可以。反沖后是正者用,還是反著用。具體到各型號
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
蛋白純化經驗指南生物谷整理 http://www.bioon.com 原創:Chromatography weixingui@263.net, 推薦書籍:《蛋白純化與實驗鑒定指南》、《生物工程下游技術》、《酶工程》、《酶制劑工業》 1) 我現在手頭
實驗步驟 一、蛋白質印跡法 蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯
拉曼光譜(Raman Spectra),是一種散射光譜。拉曼光譜分析法是基于印度科學家C.V.拉曼(Raman)所發現的拉曼散射效應,對與入射光頻率不同的散射光譜進行分析以得到分子振動、轉動方面信息,并應用于分子結構研究的一種分析方法。今天分享一些問答集錦,希望對你有幫助。一、測試了一些樣品,得到的
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單
1、 檢驗一些不易溶解的樣品時,采用超聲波超聲可使樣品溶解更快速更徹底,主成分溶解完全,沒有浪費,對含量均勻度測定沒有影響,且簡單方便且更合理。 2、乙醇作為溶劑溶解主成分時,不能溶解輔料,需要過濾。采用離心方法使輔料沉淀,取上清夜。(注意,有很多離心管不具塞子,可用柔軟的塑料薄膜袋扎橡皮筋做
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
方法一:稱取0.1~0.2克樣品置于100ml兩用瓶中,加入30ml稀王水(1+2)低溫加熱,至完全溶解,用少量水沖洗瓶壁,加熱煮沸,冷卻至室溫,稀釋至刻度,搖勻后干過濾,待測。(中、高C、W、Nb材料除外)。 方法二:稱取0.1~0.2克樣品置于可以密封的聚四氟乙烯或聚乙烯瓶中,加入10ml
6月30日,國家食品藥品監督管理總局在網站上發布新聞,表示以2014年第30號公告形式頒布了《子宮刮匙》等120項推薦性醫療器械行業標準。這是今年6月1日起新修訂的《醫療器械監督管理條例》施行后頒布的第一批醫療器械行業標準。標準的正式頒布將推動醫療器械監督管理,對保障醫療器械安全有效、促進醫療器
為進一步加強中藥飲片監督管理,完善中藥飲片質量控制體系,我委按照國家食品藥品監督管理總局工作部署,組織開展了《全國中藥飲片炮制規范》編制工作。本著統一規劃、求同存異、分步實施的原則,目前已完成第一批92個中藥飲片炮制規范草案,形成《全國中藥飲片炮制規范(一)(征求意見稿)》。 現公開征求《全國
實驗步驟 一、常規操作方案 下面這個典型流程對許多蛋白質都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 據 N g u y e n 等(1993)首先開發的方案改編而成,并用于冷泉港蛋白質純化與鑒定課程的不溶性重組蛋白純化部分(Bu
實驗步驟一、常規操作方案下面這個典型流程對許多蛋白質都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 據 N g u y e n 等(1993)首先開發的方案改編而成,并用于冷泉港蛋白質純化與鑒定課程的不溶性重組蛋白純化部分(Burgess and K n u t h , 1996)。其他類似的流程也可能
一六一、我從事藥品行業,經常測鈉,效果不好,請高手指點如何消除干擾,測定用水需要用塑料容器裝嗎?玻璃儀器用稀硝酸侵泡會有改善嗎? 1. 盡量不要用玻璃儀器裝,短時間可能影響不大。樣品最好用塑料瓶裝。 2. 注意酸度、氯離子濃度的匹配。可試驗標準加入法。 一六二、敞口消化
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題,包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸,關于包涵體的處理一般包括這么幾步:菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化,內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌? 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎
根據《全國中藥飲片炮制規范》編制工作進度安排和“全國中藥飲片炮制規范技術研究”行業專項課題研究情況,結合第一次審評會議補充資料通知意見完善情況,我委于2015年10月21日~23日在北京組織召開了飲片炮制規范技術研究資料第二次審核會議(參會人員名單見附件1)。 會議邀請了來自國內科研院校、檢驗
前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋
實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和
實驗材料鏈霉親和素-過氧化物酶 &
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗 實驗步驟
導論質粒DNA的小量制備質粒DNA的大量制備質粒DNA的純化一、導論 已經提出過許多方法用于從細菌中提純質粒DNA, 這些方法都含有以下3個步驟:細菌培養物的生長。細菌的收獲和裂解質粒DNA的純化。(一)細菌培養物的生長 從瓊脂平板上挑取一個單菌落,接種到培養物中(有含有行當抗生素
1問: 用同一套工作曲線和24份樣品在A儀器和B儀器上測試,最終各得出24個濃度值,在沒有標準值的情況下,怎樣對這兩種結果做出數值分析?以測出的銅值為例。計算出了從1號樣品到24號樣品的銅值絕對值差,差值在0.028-1之間,較集中在0.3,0.4,0.5之間.想知道同一套工作曲線和樣品在不同的
實驗步驟 一、多羥基反應單克隆抗體 我們最先使用了一類特殊的單克隆抗體, 并將其用于免疫親和層析。這些抗體可以用于溫和的免疫親和層析, 因為洗脫條件只需要聯合使用無離液鹽和低分子質量的多羥基化合物 (多元醇),此條件下蛋白質呈非
所有形式的親和層析法都需要兩個組分間形成特異性相互作用,通過這種作用可以純化其中一種組分。免疫親和層析即利用抗原和抗體的特異性相互作用,是遵循親和層析原理的一個分類 [綜述見 Subramanian(2002)]。事實上,免疫親和層析是免疫沉淀程序規模放大的拓展應用,不同的部分在于, 層析后需要回收
實驗材料感興趣的細胞或組織試劑、試劑盒糖原EDTA緩沖液SDSBSATween 20連接子T4 DNA 連接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸鈉乙醇DMSOPCR引物乙酸銨DNA ladder聚丙烯酰胺 TBE凝膠DNA參照pZErO-1 質粒TE緩沖SOC培養液Tris · Cl儀器、耗材微量離心