比較液相色譜法中正相色譜法與反相色譜法的異同
正相色譜:流動相極性小于固定相極性反相色譜:流動相極性大于固定相極性正相色譜用的固定相通常為硅膠，以及其他具有極性官能團，如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。反相色譜填料常是以硅膠為基礎，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色色譜所使用的流動相極性較強，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合最先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。以上樣品出峰順序為一般情況，而鑒于實際應用中影響色譜峰的諸多因素，可能會違背以上一般規律。因此欲深入詳細的了解，建議參考相關書籍。......閱讀全文
反相色譜
根據流動相和固定相相對極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
反相色譜柱
?反相色譜柱
反相色譜RPC
反相色譜（ RPC）是高效液相色譜HPLC最受歡迎的一個應用，尤其對蛋白的表征非常有用。因為樣品的洗脫與其增水性有很大關系，一般不可能在洗脫時間（體積）的基礎上識別被分離的樣品。通常，每一洗脫片段都必須用其它技術進行進一步的分離和分析，才能得到蛋白質分子的分子行為表征。在 HPLC系統的基礎
反相色譜介紹
反相液相色譜柱效高、分離能力強、保留機理清楚，是液相色譜分離模式中使用zui為廣泛的一種，對于生物大分子、蛋白質及酶的分離分析，反相液相色譜正受到越來越多的關．反相色語法是以表面非極性載體為固定相，面以比固定相極性強的溶劑為流動相的—種液相色譜分離模式．反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團，基于
反相色譜RPC
反相色譜（ RPC）是高效液相色譜HPLC最受歡迎的一個應用，尤其對蛋白的表征非常有用。因為樣品的洗脫與其增水性有很大關系，一般不可能在洗脫時間（體積）的基礎上識別被分離的樣品。通常，每一洗脫片段都必須用其它技術進行進一步的分離和分析，才能得到蛋白質分子的分子行為表征。 在 HPLC系統
反相色譜RPC
反相色譜（ RPC）是高效液相色譜HPLC最受歡迎的一個應用，尤其對蛋白的表征非常有用。因為樣品的洗脫與其增水性有很大關系，一般不可能在洗脫時間（體積）的基礎上識別被分離的樣品。通常，每一洗脫片段都必須用其它技術進行進一步的分離和分析，才能得到蛋白質分子的分子行為表征。 在 HPLC系統
反相色譜的反相介質是什么？
反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質也通過疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑(如
反相色譜法
反相色譜法應用中性、非極性大孔的填充材料和極性流動相。分離基于被分析物質與固定相之間的相互作用，換句話說，也就是樣品的疏水性。
反相色譜的概念
反相液相色譜柱效高、分離能力強、保留機理清楚，是液相色譜分離模式中使用最為廣泛的一種，對于生物大分子、蛋白質及酶的分離分析，反相液相色譜正受到越來越多的關．反相色語法是以表面非極性載體為固定相，面以比固定相極性強的溶劑為流動相的—種液相色譜分離模式．反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團，基于樣品
反相色譜色譜柱的選擇
色譜柱是HPLC系統非常關鍵的一部分,隨著色譜技術的發展,它也不斷地更新換代,長度變得越來越短,填料顆粒也越來越細。現在常用的色譜柱長度在30～250 mm,顆粒直徑在1.6～5μm。顆粒類型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多鍵合相選擇的優點,表面多孔具有反壓低、峰形好的優
何謂正相色譜和反相色譜
1、正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附于活性位點上。由于相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。應用特點：正相色譜一般用來分離中性化合物和離
何謂正相色譜及反相色譜
正相色譜：極性固定相和相對非極性流動相；反相色譜：相對非極性固定相和極性流動相。特點：正相健合相色譜主要用于極性化合物的分析，如脂溶性維 生素、甾族、芳香醇、芳香胺、 脂和有機氯農藥等。反相健合相色譜主用于非極性或中等極性化合物的分析， 如同系物、稠環芳烴、藥物、激素、天然產物及農藥等。
反相色譜儀分類
反相色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分：化驗室反相色譜儀和工業反相色譜儀。2、按功能可分：分析型反相色譜儀和生產型反相色譜儀。3、按分離規模可分：小型反相色譜儀和大型反相色譜儀。4、按結構可分：臺式反相色譜儀和落地式反相色譜儀。5、按用途可分：反相生物色譜儀、反相制藥色譜儀、反相化工色譜儀、反相食
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級） 三氟乙酸（TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。（1）線性梯
關于反相色譜的介紹
根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛,現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
高效反相液相色譜
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液
反相色譜柱的選擇
1.柱子的PH值使用范圍反相柱優點是固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解；當PH值大于7時硅膠易溶解；經常使用緩沖液固定相要降解。一旦發生上述情況，色譜柱人口處會塌陷
反相色譜柱效能評價
一、反相色譜柱評價條件 對于一根填充柱來說，最基本的柱性能評價指標是柱效和峰對稱的測定。反相色譜柱評價所需常用的流動相一般是甲醇或者乙腈與水的體系，對于含有酸堿性組份的樣品，流動相為甲醇或者乙腈與緩沖鹽的體系；檢測波長一般在254nm下檢測，因為在此波長處，甲醇、乙腈，磷酸緩沖
反相高效液相色譜
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合
反相色譜柱的選擇
反相色譜柱的選擇：? 1.柱子的PH值使用范圍? 反相色譜柱優點是固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。? 一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解;當PH值大于7時硅膠易溶解;經常使用緩沖液固定相要
高效反相液相色譜
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高
高效反相液相色譜
實驗方法原理反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反
何謂反相液相色譜
液-液色譜有正相和反相之分。如果采用極性固定相和相對非極性流動相，就稱為正相；如果采用相對非極性固定相和極性流動相，則稱為反相。由于極性化合物更容易被極性固定相所保留，所以正相液-液色譜系統一般可用于分離極性化合物。相反，反相液-液色譜系統一般可用于分離非極性或弱極性化合物。正相色譜的流出順序是極性
反相色譜柱效能評價
一、反相色譜柱評價條件對于一根填充柱來說，最基本的柱性能評價指標是柱效和峰對稱的測定。反相色譜柱評價所需常用的流動相一般是甲醇或者乙腈與水的體系，對于含有酸堿性組份的樣品，流動相為甲醇或者乙腈與緩沖鹽的體系；檢測波長一般在254nm下檢測，因為在此波長處，甲醇、乙腈，磷酸緩沖鹽均沒有紫外吸收，而且標
什么是反相色譜柱
固定相為非極性的色譜柱。在反相鍵合相色譜中，溶劑的極性越弱洗脫能力越強，即弱極性溶劑的洗脫強度更大
反相薄層色譜法
反相薄層色譜法反相薄層色譜是利用化學鍵合反應，將烴基硅烷鍵合到硅膠表面，制成非極性固定相，用極性較大的液體作流動相進行分離分析的方法，可克服疏水板對溶劑、系統的限制，其流動相含水量根據鍵合相不同可達20%～80%不等。常用展開劑是水和甲醇混合溶劑，其次是水和乙腈，并可使用強酸或強堿作流動相。本法可用
反相色譜中洗脫順序
反相色譜中洗脫強度順序為：水
正相色譜和反相色譜的區別
1、固定相不同：正相硅膠具有極性基的表面，而反相硅膠是經過改性，表面鍵合烷基鏈（例如 C-18），極性更小，因此對極性化合物有較小的保留。2、適用的樣品類型不同：由于反相條件下，修飾了硅膠表面的羥基，使其極性降低，使得其適用性變得更加寬廣（相對比反相而言），各類極性的大小分子，天然產物，都可以在反相
什么是正相色譜和反相色譜
正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附于活性位點上。由于相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。流動相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非
什么是正相色譜和反相色譜
正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附于活性位點上。由于相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。流動相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非