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  • WB檢測中二抗的選擇方法

    WB檢測之二抗二抗選擇二抗是用一抗免疫動物制備的抗一抗的抗體,選擇范圍較窄,基本是商品化的,在不考慮二抗修飾類型的前提下,二抗的選擇需要遵循以下原則:二抗來源種屬、一抗來源種屬和抗原來源種屬互不相同。例如如果研究對象是人的蛋白X,選擇了鼠抗X一抗,則可選擇兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗選擇要考慮的問題有:①對單抗類一抗,二抗需與一抗的類別或亞類相匹配(多抗類一抗主要是IgG類免疫球蛋白故相應二抗就是抗IgG抗體,不作考慮)。 一抗類別或亞類 二抗 IgM &......閱讀全文

    WB檢測中二抗的選擇方法

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    如何正確選擇WB檢測的抗體?

    WB免疫印跡法,也稱免疫轉移技術IBT(Immunoblotting),是Towbin將1975年Southern發明的Soutnern blotting技術應用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫學檢測方法。其操作簡便,主要用于未知蛋白檢測及抗原組分、抗原決定簇鑒定,同時也用于未知抗體的檢測和單

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    wb二抗怎么融化

    wb 二抗融化,wb 抗體用5%的脫脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先讓抗體和奶粉或者BSA 蛋白非特異結合,這樣就不會與PVDF 膜上的蛋白結合了。

    elisa檢測中二抗時間延長會造成什么影響

      二抗孵育  參考二抗的說明書,按照適當比例用封閉液稀釋辣根過氧化物酶標記的二抗。  吸盡洗滌液后,立即加入稀釋好的二抗,室溫或4℃在搖床上緩慢搖動孵育1~2小時。回收二抗。然后加入Western洗滌液,在搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后,再加入洗滌液,洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如

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    wb二抗室溫幾小時

    二抗一般室溫就行,沒要求要37度,一個小時差不多就夠了。

    wb二抗室溫幾小時

    二抗一般室溫就行,沒要求要37度,一個小時差不多就夠了。蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或

    WB一抗用什么稀釋

    建議起始濃度1:200開始(當然你也可以1:100,如果你的背景不高的話),倍比稀釋,不是再做1:100-1:1000稀釋,注意了。其實沒有必要分裝,一般都會添加保護劑的。如果你一定要分裝,建議原液分裝或是10稀釋后分裝。溶液的濃度取決于溶解在溶劑內的物質的多少。溶解度則是溶劑在特定溫度下,可以溶解

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    如何選擇實驗抗體(一抗的選擇原理及方法)?

    檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,在同一個抗體公司,可能會有好幾種,甚至好幾十種;在不同的抗體公司,那就更多了。那怎樣在琳瑯滿目的抗體中,選擇自己實驗需要的抗體呢?主要考慮如下幾種因素:分析自己實驗應用的實驗方法是哪種?分析自己實驗中標本的種屬是哪種動物或人的?分析樣本中的蛋白質的結構性質

    做wb時,一抗和二抗濃度是怎么確定的

    一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關,如果含量較高,就不需要用太多一抗,以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度(義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結果),如果樣品與廠家的不是一種細胞,可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度;二抗的用量,和你所在實驗室常規的用量就可以,如果出現效果不理想的狀態

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    一抗的選擇

    檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:?分析試驗應用的類型l?樣本蛋白的結構性質l?樣本的種屬l?抗體宿主的種類l?抗體的標記和檢測l1.分析試驗應用的類型???一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型,如:可以應用于W

    二抗的選擇

    二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse?secondary。建議檢查二抗說明書確保該抗體適用于你的檢測應用,?二抗一般連接熒光素FITC或發光團。

    梅毒檢測方法的選擇

    1. 國內梅毒血清學試驗的傳統程序是:先以非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR、TRUST、VDRL等)進行初篩,再以梅毒螺旋體抗原血清試驗(如TPPA、TPHA、FTA-ABS等)進行確認。美國、法國和比利時也采用類似的程序。該程序的優點是排除了大多數感染過梅毒但經過充分治療的病人,從而使臨床更易決

    食品中二氧化硫的檢測方法

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    做WB時羊抗鼠二抗的稀釋比例一般是多少

    【1】抗體的說明上,都給出了一個范圍,可以以這個范圍為根據摸索。開始的時候可以把膜剪成幾小塊,每一塊用不同的一抗二抗濃度,這樣就可以比較快的摸出適宜的濃度。有些時候也有一定的經驗的:我用的是SANTA CRUZ的抗體,一抗建議的稀釋比是1:200-1000,我用的是1:400效果挺好的。周圍的人用的

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    抗RNP抗體的檢測方法介紹

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