大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 (用于血清、血漿、細胞培養上清液和尿液生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TAP 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的TAP與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠TAP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,最后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,TAP濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中TAP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(Coated Wells)96孔酶標抗體工作液(Enzyme Conjugate)12ml10×標本稀釋液(Sample Buffer)12ml20×濃縮洗滌液(Wash Buffer)50ml標準品(Standards):10pmol/瓶2瓶底物工作液(TMB Solution)12ml第一抗體工作液(......閱讀全文
實驗方法原理鈉通道在多種細胞尤其是在神經、肌肉等可興奮細胞中廣泛存在。鈉電流(ⅠNa)是快反應細胞上最重要的除極離子流,與細胞的興奮性密切相關。鈉通道在膜電位-70~-65 mV開始激活,產生一迅速激活并迅速失活的內向電流,最大電流峰值在膜電位-40 ~-30 mV,反轉電位為+30 mV左右。在參
介紹隨著光吸收法可以滿足越來越多的應用檢測領域,終點法讀板機在實驗室中的占有率也越來越高。例如ELISAs方法進行細胞因子定量和Bradford法進行蛋白定量。本篇應用就是要著重比較使用Bradford法進行蛋白定量檢測時,Molecular Devices公司最新的產品EMax?
所有形式的親和層析法都需要兩個組分間形成特異性相互作用,通過這種作用可以純化其中一種組分。免疫親和層析即利用抗原和抗體的特異性相互作用,是遵循親和層析原理的一個分類 [綜述見 Subramanian(2002)]。事實上,免疫親和層析是免疫沉淀程序規模放大的拓展應用,不同的部分在于, 層析后需要回收
實驗步驟 一、多羥基反應單克隆抗體 我們最先使用了一類特殊的單克隆抗體, 并將其用于免疫親和層析。這些抗體可以用于溫和的免疫親和層析, 因為洗脫條件只需要聯合使用無離液鹽和低分子質量的多羥基化合物 (多元醇),此條件下蛋白質呈非
成纖維細胞生長因子(FGF)是最大的一類中胚層和上皮細胞生長分化多肽因子家族。FGFs在許多生物學過程中發揮重要作用,比如胚胎發育,傷口愈合,血細胞生成及血管發生等。此外,已有研究表明FGFs可以增加多種腫瘤細胞的浸潤性,如前列腺、膀胱、腎臟、乳房、胰腺等部位腫瘤。目前,共發現20多種FGFs,對不
基本方案實驗方法原理施萬細胞是周圍神經系統的成髓鞘膠質細胞,能有效地促進外周神經的再生。近年的研究表明,施萬細胞也能改善中樞神經再生的微環境,因此體外培養施萬細胞勢在必行。目前最簡便、快捷分離純化施萬細胞的方法是差速貼壁法,即根據不同細胞在培養器皿上貼壁速度的差異,去除成纖維等污染細胞,以獲得高純度
基本方案實驗方法原理施萬細胞是周圍神經系統的成髓鞘膠質細胞,能有效地促進外周神經的再生。近年的研究表明,施萬細胞也能改善中樞神經再生的微環境,因此體外培養施萬細胞勢在必行。目前最簡便、快捷分離純化施萬細胞的方法是差速貼壁法,即根據不同細胞在培養器皿上貼壁速度的差異,去除成纖維等污染細胞,以獲得高純度
實驗方法原理施萬細胞是周圍神經系統的成髓鞘膠質細胞,能有效地促進外周神經的再生。近年的研究表明,施萬細胞也能改善中樞神經再生的微環境,因此體外培養施萬細胞勢在必行。目前最簡便、快捷分離純化施萬細胞的方法是差速貼壁法,即根據不同細胞在培養器皿上貼壁速度的差異,去除成纖維等污染細胞,以獲得高純度施萬細胞
HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸鐵(Fe-NTA, Sigma);其余為國產分析純試劑。G
生物反應器(bioreactor)經歷了三個發展階段:細菌基因工程、細胞基因工程、轉基因動物生物反應器。轉基因動物生物反應器的出現之所以受到人們極大的關注,是因為它克服了前兩者的缺陷,即細菌基因工程產物往往不具備生物活性,必須經過糖基化、羥基化等一系列修飾加工后才能成為有效的藥物,而細胞基因工程又因
摘要:食品工業為保證產品質量以及對加工過程進行人為的控制,需要比較合適的分析方法。隨著生物技術的發展,生物檢測技術在食品檢驗中的應用也越來越廣泛,本文就食品檢測中主要生物檢測方法及其主要應用領域進行了綜述,旨在為生物技術在食品檢驗中的進一步應用提供參考。 1 前言 隨
0引言自19世紀后期,沙門氏菌首次被鑒定為人類的一種病原以來,檢測方法學都是建立在采取感染病人的糞便或血液作為臨床病料的基礎上。此后的60年間,用于從食品中分離沙門氏菌的方法實質上與那些用于臨床病料的方法是相同的。但由于沙門氏菌在污染食品中含量較低以及食品對檢測的干擾給沙門氏菌的檢測帶來了一定的困難
微流控芯片,高通量技術,單細胞測序,CTC循環腫瘤細胞,納米醫學,ddPCR技術,單分子免疫陣列技術(SiMoA),ctDNA,質譜檢測,大數據,人工智能等等最新技術成果與應用案例紛紛亮相。 01 微流控芯片技術 微流控芯片,又稱為芯片實驗室(Lab on a Chip),是指在幾平方厘米
微流控芯片,高通量技術,單細胞測序,CTC循環腫瘤細胞,納米醫學,ddPCR技術,單分子免疫陣列技術(SiMoA),ctDNA,質譜檢測,大數據,人工智能等等最新技術成果與應用案例紛紛亮相。 01 微流控芯片技術 微流控芯片,又稱為芯片實驗室(Lab on a Chip),是指在幾平方厘米
病理性心臟肥大如果沒有得到充分的治療,最終會導致心力衰竭。一組研究人員報道的最新發現指出,在血管緊張素II(Ang II)處理過的心肌細胞和肥大心臟中,免疫蛋白酶體催化亞基β5i表達和活性顯著增加,而且這種作用在心肌細胞和轉基因小鼠中通過β5i過表達加劇。這表明了β5i在調節心臟肥大中的新作用,因此
快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物 (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 
應用1.改良乳汁品質;2.生產藥用蛋白。3.外源基因在動物體內的位點整合問題;4.乳蛋白基因表達組織特異性問題;5.目的蛋白的翻譯后修飾問題;6.轉基因表達產物的分離和純化問題;7.轉基因的技術與方法問題;8.倫理道德問題。膀胱生物反應器膀胱反應器有著和乳腺反應器一樣的優點:收集產物蛋白比較容易,不
2019年10月3日,來自美國基因泰克公司(Genentech, Inc.)Tangsheng Yi、Robert A. Lazarus和Joseph R. Arron團隊在Cell雜志上發表了題為An Allosteric Anti-tryptase Antibody for the Trea
Western blot(WB)是檢測蛋白質及蛋白質翻譯后修飾的經典方法,可在簡單或復雜的生物樣品中提供有關靶蛋白的半定量或定量數據。WB 步驟復雜,通常包括:蛋白樣本制備→電泳→轉膜→封閉→孵育一抗→孵育二抗→顯影→分析。WB 任何過程出現 Bug 均可影響結果的重復性與靈敏度,因此必須注意將 W
2009年2月22日下午,質譜沙龍第十六期活動在第二炮兵總醫院遠程會診中心會議室舉行。此次到會者除了來自發酵研究院、清華大學醫學院、北京大學分析中心、二炮總醫院、軍事醫學科學院、解放軍307醫院、北京生命科學研究所、中科院植物所、AB公司
實驗步驟 一、蛋白質印跡法 蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯
實驗步驟一、蛋白質印跡法蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯 (PVDP) 膜上的蛋白質樣本進行非直接的檢測。在常規的蛋白質印跡中,蛋白
實驗方法原理利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+
1、側流免疫層析檢測技術 側流免疫層析檢測技術(LFIA) 也稱橫向流動免疫檢測技術,是出現于20世紀60年代初期的一種獨特的免疫分析方式,以條狀纖維層析材料為固相,借助毛細管的吸附作用使樣品在層析材料上移動,其中樣品中的待測物與層析材料上一定區域的抗
基本方案 實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震
免疫共沉淀可應用于:(1)測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;(2)確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔;(3)分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。實驗方法原理以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是:當細胞在非
實驗概要本實驗介紹了免疫共沉淀所需試劑配制及操作步驟。主要試劑1. RIPA Buffer配制基礎成分: Tris-HCl(緩沖液成分,防止蛋白變性) NaCl(鹽份,防止非特異蛋白聚集) NP-40(非離子去污劑,提取蛋白;用H2O配制成10%儲存液) 去氧膽酸鈉(離子去污劑,提取蛋白;用H2O配
實驗概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。本實驗詳細介紹了免疫共沉淀的詳細步驟及注意事項。實驗原理當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋
準備工作: 預冷PBS,RIPA Buffer,細胞刮子(用保鮮膜包好后,埋冰下),離心機 1. 用預冷的PBS洗滌細胞兩次,最后一次吸干PBS; 2. 加入預冷的RIPA Buffer(1ml/107個細胞、10cm培養皿或150cm2培養瓶,0.5ml/5×106個
實驗方法原理 以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整