實驗方法原理 收集細胞,用 D-PBSA 洗滌,重新制成 5×107個/ml 的細胞懸液,制備細胞抽提物并置于 -70°C 保存。準備凝膠裝置,取 1~2 μl的細胞抽提物、標準品及對照點樣于瓊脂糖凝膠。槽內充滿液體,將瓊脂糖凝膠置于其中,電泳 25 min,加入酶反應試劑,孵育 5~20 min 后,沖洗凝膠,干燥,檢査已完成的凝膠酶區帶的顯示。實驗材料 細胞抽提物酶底物核苷酸磷酸化酶(NP)6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PD)蘋果酸脫氫酶(MD)乳酸脫氫酶(LD)天冬氨酸氨基轉移酶(AST)6-磷酸甘露糖異構酶(MPI)肽酶B(Pep B)試劑、試劑盒 細胞抽提緩沖液或Triton X-100抽提溶液緩沖液SAB8.6D-PBSA蒸餾水去離子水儀器、耗材 Authentikit裝置和試劑瓊脂糖凝膠膜SAB8.6孵育盤襯墊孵育盤染色或洗滌盤溫度控制室的槽蓋和槽底定時電泳儀安全連接器孵育室或干燥器配有1英寸長磁力棒的磁力......閱讀全文
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
6. 高效毛細管電泳及高效毛細管電泳2質譜聯用:高效毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道,以高壓直流電場為推動力,依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的電泳分離分析方法。利用毛細管代替平板凝膠,分離效率得以提高。高效毛細管電泳的應用范圍從小分子、無機離子到生物大分子,甚至整個細
隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。 1. 血清蛋白電泳:新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5
隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。 1. 血清蛋白電泳:新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋
在臨床實驗室酶學檢查中,常常會遇到一些異常的檢查結果,這些結果與臨床癥狀不符或與其他檢查指標相矛盾,這常常是由于酶的變異所引起,它可干擾臨床醫生的正確判斷,引起診斷失誤,耽誤病情的治療。對從事檢驗工作的人員來說,了解臨床酶的變異理論,將有助于提高實驗診斷工作的準確性,為臨床醫生提供更有
電泳技術臨床應用:隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。1. 血清蛋白電泳 新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳,染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。
2物理化學鑒定通 過物理化學方法是通過種子在某些特殊的化學藥劑中產生特定的反應,測定種子的生理生化指標以鑒定品種純度。如熒光掃描分析法、苯酚染色法、愈創木酚法等。物理鑒定法,可根據不同品種種子和幼苗含有熒光物質的差異進行鑒定。如利用紫外光處理燕麥種子可產生熒光,根據熒光的有無或強弱可區分不同品種。化
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗,此后各種電泳技術及儀器相繼問世,廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和/或鑒定。近年來,先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床實驗室所采用檢驗|地帶網搜
在酶標志物分析中,同工酶的分辨和檢出是提高標志物臨床應用的重要的環節,從目前所知的腫瘤標志同工酶可分為三大類型:①異位型同工酶:指某種瘤組織改變了自己的分泌特性,而去分泌表達了其它成年組織的同工酶的類型。②胚胎型同工酶,某些組織在腫瘤狀態時,使酶的同工酶譜退化到胚胎時未分化狀態,而分泌出大量的胚胎期
實驗概要1. 掌握聚丙烯酰胺凝膠電泳技術 2. 同工酶遺傳標記的分析實驗原理同工酶是一類由具有不同分子結構和大小但具有相同催化功能的酶,其分子的多種形式是由基因決定的,即基因表達的直接產物。由同一基因座的不同等位基因編碼的各種同工酶又稱為等位酶,它們從分子水平上反映了等位基因的相對差異。因
一、實驗原理 同工酶(isozymes)是指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子形式,即催化同一種反應而結構不同的一族酶。它們是受遺傳體系決定的酶的不同分子形式。利用凝膠電泳技術可以將它們分開,用專一的作用底物和特殊染料,把需要分析的酶染色,在膠柱上呈現同工酶譜。 二、
一、實驗原理 同工酶(isozymes)是指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子 形式,即催化同一種反應而結構不同的一族酶。它們是受遺傳體系決定的酶的不同分子 形式。利用凝膠電泳 技術可以將它們分開,用專一的作用底物和特殊染料,把需要分析的酶
化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子吸收化學反應中
摘要: 化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子
摘要:化學發光免疫分析是將化學發光與免疫分析方法相結合,綜合了化學發光的高靈敏度和免疫分析的高選擇性,被廣泛應用到臨床檢測和藥物分析中。隨著新的發光試劑,新固相材料的研制以及新標記技術應用,化學發光免疫分析方法的靈敏度,重現性將大大提高。 在分析化學中,化學發光是當基態分子吸收
(一)前列腺特異性抗原(prostatespecificantigen,PSA) 1971年,Hara等首先發現PSA是由前列腺上皮細胞合成分泌至精液中,是精漿的主要成分之一;1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶,分子量34ku,編碼基因定位于19q13,PS
(一)前列腺特異性抗原(prostatespecificantigen,PSA)1971年,Hara等首先發現PSA是由前列腺上皮細胞合成分泌至精液中,是精漿的主要成分之一;1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶,分子量34ku,編碼基因定位于19q13,PSA僅
同工酶是指能催化同一種化學反應,但其酶蛋白本身的分子結構組成卻有所不同的一組酶。研究表明,植物在發育過程中,所含同工酶的種類和比例都不相同,它們與植物的遺傳、生長發育、代謝調節及抗性等都有一定關系,因此作為基因表達的產物,測定同工酶譜是認識基因存在和表達的一種工具,在植物的種群、發育及雜交遺傳的研究
實驗概要本文介紹了植物過氧化物酶同工酶測定的基本原理及操作步驟等。實驗原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成,具有三維網狀結構,其網孔大小可由凝膠濃度和交聯度加以調節。凝膠電泳兼有電荷效應和分子篩效應。被分離物質由于所載電荷數量、分子大小和形狀的差異,因此在電泳時產
在臨床上,測定血清或其他組織中一些酶的水平對很多疾病的診斷、預防及判定病情的進展具有重要意義。酶的測定可利用生化學的方法測定酶的催化活性和將酶作為蛋白用免疫方法測定酶的質量。測定酶的催化活性是最為常用方法,它具有迅速、靈敏、成本低等特點。是目前臨床上測定酶水平廣泛使用的常規方法。但這種方法也存在
酶類標志物:(一)前列腺特異性抗原1971年,Hara等首先發現PSA是由前列腺上皮細胞合成分泌至精液中,是精漿的主要成分之一;1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶,分子量34ku,編碼基因定位于19q13,PSA僅存在于前列腺上皮細胞的胞質、導管上皮和粘液內,
酶類標志物: (一)前列腺特異性抗原 1971年,Hara等首先發現PSA是由前列腺上皮細胞合成分泌至精液中,是精漿的主要成分之一;1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶,分子量34ku,編碼基因定位于19q13,PSA僅存在于前列腺上皮細胞的胞質、導管上皮和粘
酶類標志物:(一)前列腺特異性抗原1971年,Hara等首先發現PSA是由前列腺上皮細胞合成分泌至精液中,是精漿的主要成分之一;1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶,分子量34ku,編碼基因定位于19q13,PSA僅存在于前列腺上皮細胞的胞質、導管上皮和粘液內,
實驗概要人晶狀體上皮細胞原代的和永生化細胞培養是為了一個能夠調查研究人類晶狀體上皮生理及白內障的模型系統而建立的。人晶狀體上皮細胞培養是靠分離來自進行早產兒視網膜病變治療的嬰兒晶狀體上皮碎片,并且允許上皮細胞從外植體生長。通過使細胞培養感染腺病毒(Adl2-SV40)來達到細胞永生化。實驗步驟1.
聚丙烯酰胺凝膠電泳法 實驗方法原理 不同種乃至不同變種的生物不但外部形態有變異,由于結構基因的差別
實驗方法原理 不同種乃至不同變種的生物不但外部形態有變異,由于結構基因的差別,其表達產物酶和蛋白質也必然存在著一定的差別。所以同工酶分析作為一種遺傳分析手段已廣泛應用于品種資源調查、雜交子代測定、種子純度鑒定等農林業各個領域,在指導生產方面發揮了很大的作用。此外,同工酶分析對研究不同產地、不同種屬生
聚丙烯酰胺凝膠電泳法實驗方法原理不同種乃至不同變種的生物不但外部形態有變異,由于結構基因的差別,其表達產物酶和蛋白質也必然存在著一定的差別。所以同工酶分析作為一種遺傳分析手段已廣泛應用于品種資源調查、雜交子代測定、種子純度鑒定等農林業各個領域,在指導生產方面發揮了很大的作用。此外,同工酶分析對研究不
臨床上可根據酶濃度的變化用以輔助診斷。若酶濃度變化由細胞壞死或細胞膜通透性變化引起,表示臟器或組織損傷;若為細胞內酶合成增加所致,提示組織再生、修復、成骨或異位分泌,或提示有惡性腫瘤的可能;若為酶排泄障礙引起者說明有梗阻存在。同工酶的分析與鑒定則能反應疾病的部位、性質和程
牧草品種的真假和種子質量的優劣直接關系到草業生產安全、農民增收和農(牧)區社會穩定。隨著農牧業生產對優良牧草品種需求的提高,每年進入市場的育成牧草新品種數量也在快速增加,各種優良牧草品種越來越受到青睞,種植面積越來越大。而一些不法商家在利益驅動下,在種子生產經營過程中以假亂真、以次充好,坑農害農
內容:一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如