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    WesternBlot的過程與優化,著重于化學發光檢測3

    六、使用化學發光底物的印跡法和操作規程的優化6.1 使 用 化 學 發 光 底 物 的 蛋 白 質 印 跡 法(1) 凝膠電泳分離蛋白質樣品。(2) 制備轉移緩沖液。采 用 4 〇 0 m L 超 純 水 制 備 Tris— 甘氨酸轉移緩沖液,再加人IOOmL 甲醇。 4°C 下 使 用 和 保 存 該 轉 移 緩 沖 液 。注 : 轉 移 緩 沖 液 : 25 mm 〇 I/LTris、192 mmol,L 甘氨酸 (pH8_ 0),2 0 % 甲醇。(3) 為濕轉移制作凝膠「三明治」(圖 33.8)。對于半干的轉移,在陰極和陽極間按同樣的步驟制作三明治。, : 在三明治裝配前將襯墊和濾紙浸泡在轉移緩沖液中。⑷將蛋白質從滅膠轉移到膜上。濕轉移時如果使用為 g cmX1 〇 c m 凝設計的迷你轉移裝置,則 40 V 轉 移 90min, 并保持緩沖液溫度為4 ℃ 。半干型轉移時,15 v 轉移90 min。注: 通過凝膠染色或......閱讀全文

    Western Blotting

    實驗概要Western Blot (AP)主要試劑1. Membrane Blocking buffer:5% Milk ? 0.05% of Tween 20 PBS2. antibody dilution buffer: PBS 0.05% of Tween20 1.0% Milk(or BSA

    Western雜交

    Western雜交l??????組織印跡的Western雜交在硝酸纖維素膜上制備組織印跡1.在塑料板上放置兩層Whatman 1號濾紙,在濾紙上方放上一張普通紙,然后鋪上一層硝酸纖維素膜。2.用雙面刀片從植物組織如大豆的莖上切取一塊切片(厚度約為1mm)。如果組織表面是濕的,則在Kimwipes紙上

    Western雜交

    實驗概要本實驗介紹了Western雜交的基本流程。主要試劑液氮,提取緩沖液(1 x PBS,10ug/mL ?Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),轉移緩沖液(39mM Glycine,48mM ?Tris,0.037% SDS,20%甲醇),

    Western Blotting

    1. Optional: "Renature" gel- this is thought to permit some refolding of proteins and may be important in finding epitope recognition of monoclonal an

    Western 雜交

    Western?雜交(主要內容如下)Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa

    Western雜交

    實驗概要本實驗介紹了Western雜交的基本流程。主要試劑液氮,提取緩沖液(1 x PBS,10ug/mL ?Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),轉移緩沖液(39mM Glycine,48mM ?Tris,0.037% SDS,20%甲醇),

    Smolke:Protocols/Western

    Overview Blotting for large V5-tagged proteins in?S. cerevisiae Materials Y-PER (Pierce) Halt EDTA-free Protease Inhibitor (Pierce) NuPA

    Silver: Lysate for Western

    Grow cellsHarvestSpin downWash with PBSSpin down enough cells to collect a 50-100 μL cell pellet in a FastPrep tubePrepare lysis buffer (beforehand) a

    western 是什么

    向西的;自西的;西洋的;北美及南美的;西部的人;西歐人;西部片;西方的

    Western Blotting Protocols

    back to topProtocolStandard vs. Rapid Immunodetection ProceduresThere are two types of protocols for immunodetection: Standard and rapid.Standard vs.

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