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  • 微載體的原理與操作

    1.原理:其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,故細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。黏附主要是靠靜電引力和范德華力。細胞能否在微載體表面黏附,主要取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。2. 攪拌轉速:由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因而無法靠提高攪拌轉速來增加接觸概率。通常的操作方式是:在貼壁期采用低攪拌轉速,時攪時停;數小時后,待細胞附著于微載體表面時,維持設定的低轉速,進入培養階段。微載體培養的攪拌非常慢,最大速度75r/min。3.細胞與微載體的相融性,是與微載體表面理化性質有關。一般細胞在進入生理PH值時,表面帶負電荷。若微載體帶正電荷,則利用靜電引力可加快細胞貼壁速度。若微載體帶負電荷,因......閱讀全文

    微載體的原理與操作

    1.原理:其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,故細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展

    微載體培養操作要點

    ●培養初期:保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平,接種細胞(對數生長期,而非穩定期)至終體積1/3的培養液中,以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量,更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。●貼壁階段(3-8d)后,緩慢加入培養

    微載體的應用原理

    1.原理:其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。  貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,故細胞在微載體表面的貼附是進一步

    微載體培養的原理

    ?? 微載體培養技術(micro-carrierculturetechnique)于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。??? 微載體是指直徑60-250μm,能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚

    微載體培養技術(microcarrier-culture-technique)原理操作2

    5. 微載體培養操作要點 ●培養初期:保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平,接種細胞(對數生長期,而非穩定期)至終體積1/3的培養液中,以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量,更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。 ●

    微載體培養技術(microcarrier-culture-technique)原理操作1

    一、微載體培養應用此技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術目前已漸日趨完善和成熟,并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前公認的最有發展前途的一種動物細胞大規模培養技術,其兼具懸浮培養和貼壁培養的優點,放大容易。目前微載體培養廣泛用于培養各種類型細胞,生產

    微載體

    實驗方法原理以高濃度接種細胞和微珠,然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。實驗材料起始培養物儀器、耗材生長培養基微載體攪拌培養瓶磁力攪拌器實驗步驟1. 按照所需最終培養液量的 1/3,以 2~3 g/L 混懸微珠。2. 用胰蛋白酶消化和計數細胞,以正常接種濃度的 3~5 倍將細胞接種到微珠懸液中。3.

    微載體

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠,然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物

    微載體

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠,然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物

    微載體實驗

    實驗方法原理?以高濃度接種細胞和微珠,然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。實驗材料?起始培養物儀器、耗材?生長培養基微載體攪拌培養瓶磁力攪拌器實驗步驟 1. 按照所需最終培養液量的 1/3,以 2~3 g/L 混懸微珠。2. 用胰蛋白酶消化和計數細胞,以正常接種濃度的 3~5 倍將細胞接種到微珠懸液中

    微載體的分類系統

    生物反應器系統此技術大規模培養,細胞擴增的效率受到諸多因素的影響和限制,其中主要的限制性因素包括:細胞對剪切力的敏感性、氧的傳遞以及傳代和擴大培養等。而研制的各種類型生物反應器系統則可針對上述限制性因素,為微載體細胞培養與擴增提供低剪切力、高氧傳遞效率、易于細胞傳代等適宜的外部環境。已較多使用的微載

    微載體的基本介紹

    自Van Wezel用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一種微載體問世以來,國際市場上出售的微載體商品的類型已經達十幾種以上,包括液體微載體、大孔明膠微載體、聚苯乙烯微載體、PHEMA微載體、甲殼質微載體、聚氨酯泡沫微載體、藻酸鹽凝膠微載體以及磁性微載體等。常用商品化微載體有三種:Cyt

    什么是微載體?

    是指直徑在60-250μm,能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。

    固相萃取與固相微萃取的原理及操作

    固相萃取與固相微萃取的原理及操作  固相萃取(SolidPhaseExtractionSPE)就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達到分離和富集目標化合物的目的。  與液-液萃取相比固相萃取有很多優點:固相萃取不需要大量互不相

    微載體細胞培養技術及應用原理

      微載體細胞培養技術是細胞培養過程中常見的一種細胞培養技術。關于微載體細胞培養技術,以動物細胞為例,具體介紹如下:   一、微載體培養技術的應用   微載體培養技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術目前已漸日趨完善和成熟,并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。

    微載體細胞計數的難題與解決方案

    細胞和病毒生產的放大培養面臨挑戰。當需要生產量增加千倍時,細胞培養瓶對于工業規模生產是不可行的。微載體為生物反應器中貼壁細胞的生長提供了方便, 微載體充當貼壁細胞可附著的支架,允許它們增殖,而生物反應器使細胞-微載體復合體自由懸浮在培養基中。因此,貼壁細胞也可以像懸浮細胞那樣生長,從而簡化了放大培養

    微載體的定義和應用

    中文名稱:微載體英文名稱:microcarrier定義:細胞培養中所使用的一類無毒性、非剛性、密度均一、通常是透明的小顆粒。能使依賴貼壁的細胞在懸浮培養時貼附在顆粒表面單層生長,從而增加細胞貼附生長的面積,有利于細胞的大規模培養和收集。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(二級學科

    微載體的主要類型介紹

    國際市場上出售的微載體商品的類型已經達十幾種以上,包括液體微載體、大孔明膠微載體、聚苯乙烯微載體、PHEMA微載體、甲殼質微載體、聚氨酯泡沫微載體、藻酸鹽凝膠微載體以及磁性微載體等。常用商品化微載體有三種:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。

    微載體培養的技術特點

    ●表面積/體積(S/V)大,因此單位體積培養液的細胞產率高;  ●把懸浮培養和貼壁培養融合在一起,兼有兩者的優點;  ●可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況;  ●簡化了細胞生長各種環境因素的檢測和控制,重現性好;  ●培養基利用率較高;  ●放大容易;  ●細胞收獲過程不復雜;  ●勞動強

    微載體技術的培養優點

    ●表面積/體積(S/V)大,因此單位體積培養液的細胞產率高;●把懸浮培養和貼壁培養融合在一起,兼有兩者的優點;●可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況;●簡化了細胞生長各種環境因素的檢測和控制,重現性好;●培養基利用率較高;●放大容易;●細胞收獲過程不復雜;●勞動強度小;●培養系統占地面積和空

    微載體培養的技術方法

    微載體培養是指微載體以微小顆粒作為細胞貼附的載體,可提供相當大的貼附面積,由于載體體積很小,比重較輕,在輕度攪拌下即可使得細胞懸浮在培養液內,最終能夠使細胞在載體表面繁殖成單層的一種細胞培養技術。

    微載體的主要應用方向

    ●在細胞方面,如細胞群體、狀態和類型。  ●在微載體方面,如微載體表面狀態、吸附的大分子和離子;微載體表面光滑時細胞擴展快,表面多孔則擴展慢。  ●在培養環境中,如培養基組成、溫度、pH、DC以及代謝廢物等均明顯影響細胞在微載體上的生長。如果所處條件最優,則細胞生長快;反之生長速度慢。  5. 微載

    微載體細胞培養技術及應用原理(一)

    微載體細胞培養技術是細胞培養過程中常見的一種細胞培養技術。關于微載體細胞培養技術,以動物細胞為例,具體介紹如下: 一、微載體培養技術的應用微載體培養技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術目前已漸日趨完善和成熟,并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前公認的

    微載體細胞培養技術及應用原理(二)

    5.微載體培養操作要點? 培養初期:保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平,接種細胞(對數生長期,而非穩定期)至終體積1/3的培養液中,以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量,更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。? 貼壁階

    固相微萃取的操作及原理

      操作  其裝置類似于一支氣相色譜的微量進樣器,萃取頭是在一根石英纖維上涂上固相微萃取涂層,外套細不銹鋼管以保護石英纖維不被折斷,纖維頭可在鋼管內伸縮。將纖維頭浸入樣品溶液中或頂空氣體中一段時間,同時攪拌溶液以加速兩相間達到平衡的速度,待平衡后將纖維頭取出插入氣相色譜汽化室,熱解吸涂層上吸附的物質

    微載體的三個方面

    ●在細胞方面,如細胞群體、狀態和類型。●在微載體方面,如微載體表面狀態、吸附的大分子和離子;微載體表面光滑時細胞擴展快,表面多孔則擴展慢。●在培養環境中,如培養基組成、溫度、pH、DC以及代謝廢物等均明顯影響細胞在微載體上的生長。如果所處條件最優,則細胞生長快;反之生長速度慢。5. 微載體培養操作要

    質粒與載體

    一、質粒絕大多數的生物都是以DNA 的形式來儲藏其遺傳信息。遺傳物質要能生生不息地傳給后代的首要條件就是它至少要具有一個復制原(ori, origin of replication,或譯為復制起點),使整個基因體得以復制。含有復制原的遺傳物質稱為replicon,我們姑且把它譯為為復制體吧!原核性復

    EDTA滴定的原理與操作

    鎂的檢測可以用EDTA滴定法分析。由于鎂比鋁輕,因此可以作為合金在航空、航天上使用。另外利用鎂易于氧化的性質,可用于制造許多純金屬的還原劑。也可用于閃光燈、吸氣器等。測定水的總硬度就是測定水中鈣、鎂離子的總含量,可用EDTA配位滴定法測定:滴定前: M + EBT M-EBT(紅色)主反應: M +

    什么是動物細胞的微載體培養

    微載體培養:微載體以細小的顆粒作為細胞載體,通過攪拌懸浮在培養液內,使細胞在載體表面繁殖成單層的一種細胞培養技術。可以充分利用培養液,保持了貼壁細胞的生長特性,還可以進行高密度培養。

    自動固相微萃取的原理與特點

      自動固相微萃取是一種新的樣品前處理方法,可以采樣,提取工作同時進行,這是一種無溶劑的樣品處理技術。它實現了樣品濃縮,解吸和進樣一體化,幾乎不會產生二次污染。為了更好地利用這項技術,我們需要仔細了解它的原理和特性。  自動固相微萃取是在固相萃取(SPE)的基礎上開發的一種新的樣品預處理技術。它使用

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