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  • DNA變性的融解溫度

    對雙鏈DNA進行加熱變性,當溫度升高到一定高度時,DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值,隨后即使溫度繼續升高,吸光度也不再明顯變化。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖,得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。可見DNA變性是在一個很窄的溫度范圍內發生的。通常將核酸加熱變性過程中,紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為核酸的解鏈溫度,由于這一現象和結晶的融解相類似,又稱融解溫度(Tm,melting temperature)。在Tm時,核酸分子內50%的雙螺旋結構被破壞。特定核酸分子的Tm值與其G+C所占總堿基數的百分比成正相關,兩者的關系可表示為:? Tm=69.3+0.41*(G+C)%?一定條件下(相對較短的核酸分子),Tm值大小還與核酸分子的長度有關,核酸分子越長,Tm值越大;另外,溶液的離子強度較低時,Tm值較低,融點范圍也較寬,反之亦然,因此DNA制劑不應保存在離子強度過低的溶液中。......閱讀全文

    什么是變性DNA?

    中文名稱變性DNA英文名稱denatured DNA定  義由于物理(如過熱)或化學(如加入尿素)等因素的影響,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、雙鏈的螺旋結構,而成為松散的和單鏈的結構。去除變性因素,DNA一般可以復性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    什么是DNA變性?

      DNA變性,是指核酸雙螺旋堿基對的氫鍵斷裂,堿基間的堆積力遭到破壞,雙鏈變成單鏈,使核酸的天然構象和性質發生改變,但不涉及其一級結構的改變。凡能破壞雙螺旋穩定的因素(如加熱、極端的pH、有機試劑如甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等)均可引起核酸分子變性。變性后的DNA常發生一些理化及生物學性質的改變: 

    變性DNA的定義

    中文名稱變性DNA英文名稱denatured DNA定  義由于物理(如過熱)或化學(如加入尿素)等因素的影響,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、雙鏈的螺旋結構,而成為松散的和單鏈的結構。去除變性因素,DNA一般可以復性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    細胞化學詞匯變性DNA

    中文名稱:變性DNA英文名稱:denatured DNA定  義:由于物理(如過熱)或化學(如加入尿素)等因素的影響,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、雙鏈的螺旋結構,而成為松散的和單鏈的結構。去除變性因素,DNA一般可以復性。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級

    變性DNA的結構特點

    中文名稱變性DNA英文名稱denatured DNA定  義由于物理(如過熱)或化學(如加入尿素)等因素的影響,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、雙鏈的螺旋結構,而成為松散的和單鏈的結構。去除變性因素,DNA一般可以復性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    DNA變性的融解溫度

    對雙鏈DNA進行加熱變性,當溫度升高到一定高度時,DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值,隨后即使溫度繼續升高,吸光度也不再明顯變化。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖,得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。可見DNA變性是在一個很窄的溫度范圍內發生的。通常將核酸加熱變性過程中,

    關于DNA變性的應用介紹

      DNA變性,也可用于檢測兩個不同的DNA序列之間之序列差異。將DNA加熱和變性成單鏈狀態,并將該混合物冷卻使可以重新進行雜交。雜交分子的相似序列中如果互補序列有差異,則會導致堿基配對中斷。在基因組范圍中,該方法已被用于估算兩物種之間遺傳距離的研究,稱為DNA-DNA雜交。在其中的單個分區的DNA

    DNA變性的融解溫度介紹

      對雙鏈DNA進行加熱變性,當溫度升高到一定高度時,DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值,隨后即使溫度繼續升高,吸光度也不再明顯變化。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖,得到的典型DNA變性曲線呈S型。可見DNA變性是在一個很窄的溫度范圍內發生的。通常將核酸加熱變性過程中,紫外光

    dna變性溫度與dna的組成有什么關系

    對雙鏈DNA進行加熱變性,當溫度升高到一定高度時,DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值,隨后即使溫度繼續升高,吸光度也不再明顯變化。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖,得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。可見DNA變性是在一個很窄的溫度范圍內發生的。通常將核酸加熱變性過程中,

    關于DNA變性的基本信息介紹

      變性DNA常發生一些理化及生物學性質的改變:  1)溶液粘度降低。DNA雙螺旋是緊密的剛性結構,變性后代之以柔軟而松散的無規則單股線性結構,DNA粘度因此而明顯下降。  2)溶液旋光性發生改變。變性后整個DNA分子的對稱性及分子局部的構性改變,使DNA溶液的旋光性發生變化。  3)增色效應(hy

    變性梯度凝膠電泳不同的雙鏈DNA-片段

      不同的雙鏈DNA 片段因為其序列組成不一樣,所以其解鏈區域及各解鏈區域的解鏈濃度也是不一樣的。當它們進行DGGE時,一開始變性劑濃度比較小,不能使雙鏈DNA 片段最低的解鏈區域解鏈,此時DNA 片段的遷移行為和在一般的聚丙烯酰胺凝膠中一樣。然而,一旦變性劑濃度達到DNA 片段最高的解鏈區域溫度時

    制備DNA測序模板實驗——雙脫氧測序的雙鏈質粒DNA的堿變性

    實驗材料DNA試劑、試劑盒NaOHEDTA乙酸鈉乙醇儀器、耗材離心管離心機搖床實驗步驟1. ?加入約0.5 pmol 重組質粒DNA于0.5 ml 微量離心管中,如果體積大于20 μl 應以乙醇沉淀,重溶于20 μl 水。2. ?如果體積小于20 μl,用水補足20 μl。3. ?加入2 μl 2

    抗單鏈(變性)DNA抗體檢測的臨床意義

      抗ssDNA的測定結果缺乏疾病特異性,除SLE患者有較高檢出率(50%~60%)外,其他風濕病如混合性結締組織病(MCTD)、藥物誘導的狼瘡、硬皮病、皮肌炎、干燥綜合征,類風濕性關節炎等也都有10%~70%的檢出率。當抗dsDNA陰性而SLE的診斷尚未明確時,高滴度抗ssDNA的存在對診斷也有參

    PCR技術中DNA受高溫變性說明其具有什么性

    90~95攝氏度會解旋,書上好象沒有說這是什么性呃,老師也沒講.溫度不能太高,一般來說,DNA解鏈(氫鍵斷裂)的溫度在100℃以內,具體數值和DNA鏈中G、C堿基的含量有關,G、C堿基含量越多,DNA解鏈溫度越高.如果溫度太高,DNA是會斷裂的(磷酸二脂鍵斷裂),即使降溫,也無法重新合成雙鏈了.

    根據核酸的吸收光譜,如何判斷DNA的變性和復性

    DNA的變性、復性和雜交1.變性,這是DNA最重要的一個性質。①DNA雙鏈之間以氫鍵連接,氫鍵是一種次級鍵,能量較低,易受破壞,在某些理化因素作用下,DNA分子互補堿基對之間的氫鍵斷裂,使DNA雙螺旋結構松散,變成單鏈,即為DNA變性。DNA變性只涉及二級結構改變,不伴隨一級共價鍵的斷裂。②監測DN

    核酸的變性的變性溫度

      熱變性一半時的溫度稱為熔點或變性溫度,以Tm來表示。DNA的G+C含量影響Tm值。由于G≡C比A=T堿基對更穩定,因此富含G≡C的DNA比富含A=T的DNA具有更高的熔解溫度。根據經驗公式xG+C =(Tm ?-69.3)× 2.44可以由DNA的Tm值計算G+C含量,或由G+C含量計算Tm值。

    什么核酸變性?

    在一定理化因素作用下,核酸雙螺旋等空間結構中堿基之間的氫鍵斷裂,變成單鏈的現象稱為變性(denaturation)。引起核酸變性的常見理化因素有加熱、酸、堿、尿素和甲酰胺等。在變性過程中,核酸的空間構象被破壞,理化性質發生改變。由于雙螺旋分子內部的堿基暴露,其A260值會大大增加。A260值的增加與

    甲醛變性電泳

    實驗概要本實驗介紹了RNA電泳(即甲醛變性電泳)的原理及操作步驟等。實驗原理提取樣品的總RNA后,一般根據RNA的凝膠電泳圖來判斷RNA的質量。由于RNA容易形成二級結構,因此常用甲醛變性膠來進行RNA電泳,得到的電泳圖能真實反映RNA的質量狀況。將RNA通過凝膠電泳使之在凝膠中分離出來,通過加入標

    關于蛋白質變性的變性結果介紹

      1、生物活性喪失  蛋白質的生物活性是指蛋白質所具有的酶、激素、毒素、抗原與抗體、血紅蛋白的載氧能力等生物學功能。生物活性喪失是蛋白質變性的主要特征。有時蛋白質的空間結構只要輕微變化即可引起生物活性的喪失。  2、某些理化性質  蛋白質變性后理化性質發生改變,如溶解度降低而產生沉淀,因為有些原來

    還原/非還原、變性/非變性SDS具體有什么不同

    SDS是一種有效的變性劑,它能夠斷裂蛋白質分子的氫鍵和疏水作用,這個是SDS的一般原理,這也就是所講的還原性SDS,這也是最有效的一種,因為鍵的斷裂伴隨的是蛋白質分子的伸展,這樣我們的SDS就可以根據蛋白質的情況結合,從而把我們的蛋白質分子帶上負電荷,可以電泳。有一點就是這是我們講的還只是SDS。并

    還原/非還原、變性/非變性SDS具體有什么不同

    SDS是一種有效的變性劑,它能夠斷裂蛋白質分子的氫鍵和疏水作用,這個是SDS的一般原理,這也就是所講的還原性SDS,這也是最有效的一種,因為鍵的斷裂伴隨的是蛋白質分子的伸展,這樣我們的SDS就可以根據蛋白質的情況結合,從而把我們的蛋白質分子帶上負電荷,可以電泳。有一點就是這是我們講的還只是SDS。并

    椎間盤變性的簡介

      椎間盤  椎間盤是位于人體脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨覆蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大

    變性梯度凝膠電泳

    實驗材料?DNA樣品試劑、試劑盒?尿素去離子甲酰胺丙烯酰胺甲叉雙丙烯酰胺瓊脂糖 儀器、耗材?PCR擴增儀變性梯度凝膠電泳儀凝膠成像及分析系統紫外透射儀高速離心機電泳儀電泳槽微量加樣器Tip頭Tip頭盒Eppendorf管Eppendorf管架

    變性梯度凝膠電泳

    變性梯度凝膠電泳(DGGE) ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 變性梯度凝膠電泳(DGGE)是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。核酸的雙螺旋結構在一定條

    變性梯度凝膠電泳

    變性梯度凝膠電泳(DGGE)是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。(1)將凝膠設置在雙重變性條件下,可以檢測DNA分子中的任何一種單堿基的替代、移碼突變以及少于10個堿基的缺失突變,被廣泛應用于基因突變檢測及相關研究。(2) 用于癌癥和遺傳病的篩查及診斷,而且,在癌癥(殘存性病灶、突變

    RNA甲醛變性膠電泳

    提取樣品的總RNA后,一般根據RNA的凝膠電泳圖來判斷RNA的質量。由于RNA容易形成二級結構,因此常用甲醛變性膠來進行RNA電泳,得到的電泳圖能真實反映RNA的質量狀況。一、試劑:DEPC(Sigma公司產品),MOPs(Bocherigmer公司產品),甲酰胺(Formamide,Sigma公司

    非變性膠蛋白電泳

    ?Section 2.1Nondenaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis of ProteinsJohn M. Walker1. IntroductionSDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commo

    椎間盤變性的臨床診斷

      影像學表現  1、CT表現  ①椎間盤高度降低:CT掃描側位定位片及矢狀面重建像可顯示這一改變。  ②椎間盤真空變性:90%為氮氣,橫斷面示椎間盤內不規則氣體密度區。20-40歲可有35%出現此征象。  ③許莫氏結節(Schmorl's nods):為脫出髓核通過終板進入椎體的壓跡,表現

    核酸的變性的作用

      變性作用是核酸的重要性質。核酸的變性指核酸雙螺旋結構被破壞,氫鍵斷裂,變為單鏈。核酸變性只涉及次級鍵的變化,并不引起共價鍵的斷裂。引起變性的因素很多,升高溫度、過酸、過堿、純水以及加入變性劑等可破壞氫鍵,妨礙堿基堆積作用和增加磷酸基團靜電斥力的因素都能造成核酸變性。核酸變性后,260nm的紫外吸

    蛋白質的變性

      蛋白質變性是指當天然蛋白質受到物理或化學因素的影響時,使蛋白質分子內部的二、三、四級結構發生異常變化,從而導致生物功能喪失或物理化學性質改變的現象。  常見的引起蛋白質變性的因素有:物理因素:熱作用、高壓、劇烈震蕩、輻射等;化學因素有:酸、堿、重金屬離子、高濃度鹽、有機溶劑等。  變性對蛋白質功

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