• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • Antpedia LOGO WIKI資訊

    EMSA凝膠遷移(Electrophoreticmobilityshiftassay)

    實驗概要凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。實驗原理凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時,依據目的RNA結合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或......閱讀全文

    生化實驗講義(理論部分)——層析技術(五)

      柱床體積Vt可以通過加入一定量的水至層析柱預定標記處,然后測量水的體積來測定。外水體積Vo可以通過測定完全排阻的大分子物質的洗脫體積來測定,一般常用藍色葡聚糖-2000作為測定外水體積的物質。因為它的分子量大(為200萬),在各種型號的凝膠中都被排阻,并且它呈藍色,易于觀察和檢測。&n

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術

            聚丙烯酰胺凝膠電泳儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,于1959年建立,1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理:   

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗

    實驗步驟:3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時,每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶(由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶,首先要創建一個新的項目。一旦建立,該項目就屬于這個用戶,這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度,盡量不要用手動輸入操作。因此,

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗

    儀器、耗材DBMS實驗步驟3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時,每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶(由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶,首先要創建一個新的項目。一旦建立,該項目就屬于這個用戶,這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度,盡量不要用手動輸入操作

    常規聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗——檢測

    實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗

    對于復雜混合物,如全細胞裂解物或富集的亞細胞組分,通過兩步正交的分離 (orthogonalseperation),二維凝膠 (2D 膠)電泳可以很好地分離成幾百個至上千個單個蛋白質。第一次分離基于電荷,即使用變性等電聚焦電泳; 第二次分離基于表觀分子質量,即使用變性十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗             試劑、試劑盒 樣品緩沖液

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術

            聚丙烯酰胺凝膠電泳儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,于1959年建立,1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理: &n

    蛋白質凝膠染色法實驗

    實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群,使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度,那么銀

    凝膠色譜技術概述

    凝膠色譜法凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由于設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用,不但應用于科學實驗研究,而且已經大規模地用于工業生產。一、基本理論

    凝膠色譜法簡介

      凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由于設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用,不但應用于科學實驗研究,而且已經大規模地用于工業生產。 &n

    凝膠層析法概述

    凝膠層析法(gel chromatography)也稱分子篩層析法,是指混合物隨流動相經過凝膠層析柱時,其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術。該法設備簡單、操作方便、重復性好、樣品回收率高,除常用于分離純化蛋白質、核酸、多糖、激素等物質外,還可用于測定蛋白質的相對分子質量,以及樣品的脫鹽和濃

    分子生物學常用實驗技術(page 3)

    分子雜交技術    互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN

    凝膠色譜儀標準操作規程(SOP)

    背景知識:凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由于設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用,不但應用于科學實驗研究,而且已經大規模地用于工業生產。一、基本理論(一)分

    凝膠色譜儀標準操作規程

      一、基本理論   (一)分子篩效益   一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時,各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可

    凝膠色譜儀使用操作規程

      一、基本理論   (一)分子篩效益   一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時,各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙

    蛋白質技術——雙向電泳

    實驗概要蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心.  雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1000個E.coli蛋白,并表明蛋白質譜不是穩定的,而是隨環境而變化.  雙向電泳原理簡明,第一向進行等電聚焦,蛋白質沿pH梯度分離,至各自的等電點;隨后,再

    蛋白質凝膠染色法實驗2

    2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n 2+ 反染法相同),且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮)的激發光

    變性條件下的凝膠電泳實驗

    SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗 梯度膠凝膠電泳 SDS-尿素膠凝膠電泳             實驗方法原理

    放射自顯影和從測序凝膠上讀取 DNA 序列實驗

    本實驗介紹關于放射自顯影和從測序凝膠上讀取 DNA 序列的過程。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。實驗步驟材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的配方見附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。凝膠固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋

    放射自顯影和從測序凝膠上讀取 DNA 序列實驗

    實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的配方見附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。凝膠固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性混合物放射性墨水或化學發光標記物參見附錄 9。可重復使用的放射性墨水主要是選擇 Strat

    MIT 趙選賀團隊讓醫療器械長出柔軟耐用的水凝膠皮膚

      做過胃腸鏡和插過導尿管的人都會知道,硬塑料橡膠在人體柔軟組織中拖動摩擦所帶來的痛苦。而且,導尿管等醫療器械表面容易粘附細菌、生長異物。這些問題困擾著全球幾千萬人。水凝膠柔軟多水,表面光滑抗菌,是和人體接觸的最好界面。可是怎么讓各種醫療儀器,例如導尿管、內窺鏡等附上一層足夠厚又耐用的水凝膠涂層?該

    二維凝膠的定量分析實驗

    儀器、耗材開放源代碼軟件實驗步驟3.1 實驗設計1. 平行設計不同凝膠之間部分蛋白質點的量變是不可控的。重復樣品之間或從蛋白質樣品制備到二維凝膠染色的任何步驟的生物學差異,都是這些不可控變化的原因。已經表明,批次效應(即不同系列同時運行電泳和染色的二維凝膠的變化)對二維電泳的結果影響很大,因此在實驗

    變性條件下的凝膠電泳實驗——SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗

    實驗方法原理SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是對蛋白質進行量化,比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法主要依據蛋白質的分子量對其進行分離。SDS 與蛋白質的疏水部分相結合,破壞其折疊結構,并使其穩定地存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS 蛋白質復合物的長度與其分子量成正比

    二維凝膠的定量分析實驗

    儀器、耗材開放源代碼軟件                                       &nbs

    《德國應化》:冷凍電鏡對“原生態”微凝膠納米結構表征

      背景介紹  水凝膠微球,也稱為微凝膠,是一種可以被水溶脹的納米材料,是由交聯的親水或兩親性聚合物組成。與固體微球相比,這種微球有良好的生物相容性,pH值和溫度響應性的特點,而且柔軟性和穩定性出色,在高性能催化、生物分子、給藥系統和組織工程學等領域有潛在應用。  研究者通過設計不同的納米復合結構,

    電泳技術

    電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。    電泳技術的

    蛋白質的雙向電泳實驗方法

    第一向(等電點聚焦,IEF)1)凝膠條的準備1.以帽凝膠端(2個校準環:4mm和10mm)朝下,將4根玻璃管插入兩個凝膠灌注裝置的每個托架中,這樣玻璃管恰好站在兩個分隔室之一的“充填船”上。從玻璃管頂端到玻璃管底端拉入PP線(小心,線不易移動),否則以后將不能用它們將膠溶液拉上來。2.溶解分離膠溶液

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術(二)

    四、聚丙烯酰胺凝膠性能指標:1、性能指標:聚丙烯酰胺凝膠性能指標有凝膠總濃度和交聯度等。(1)凝膠總濃度(T):凝膠總濃度表示凝膠溶液中單體和交聯劑的總百分含量。        T = [(a + b)/m]×100%式中:a為單

    電泳的原理、分類和應用

      【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。  1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。 

  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载