經驗：反相HPLC柱子的清潔和再生
反相色譜是迄今在高效液相色譜中應用最廣泛的技術，主要是因為它適用于分析極大多數的非極性物質和很多的可離子化的離子化合物。大多數用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的物質也能以同樣的保留方式分離。圖片來源于網絡 固定相上還有少數物質，如混合相(例如苯基-己基)、末端封閉和非末端封閉種類和極性嵌入相-也存在于這些鍵合硅膠上。還有很多填料用于反相色譜，包括聚合物，聚合物表面涂上硅膠和氧化鋁，無機-有機混合物，涂層氧化鋯，和石墨化碳。不同種類的固定相有他們自己的優點和缺點。 反相色譜柱利用各種流動相和添加物可以有很多的應用。一些技術利用添加物可以改變或修飾填料的表面。有時候這些添加物有可能會污染鍵合相表面。 硅膠表面因為有著疏水鍵合相而有一些別的化學性質。殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中。這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物合基質成分，特別是堿......閱讀全文
簡述反相HPLC色譜柱的再生步驟
1.取下色譜柱，然后重新連接到色譜儀上，讓液體/氣體反方向流過色譜柱。 2.用HPLC級水沖洗掉鹽/緩沖液。以1毫升/分鐘的速度把25毫升水泵入色譜柱。 3.用25毫升異丙醇沖洗色譜柱。 4.用25毫升二氯甲烷沖洗色譜柱。 5.用25毫升正己烷沖洗色譜柱。
反相色譜柱
?反相色譜柱
經驗：反相HPLC柱子的清潔和再生
反相色譜是迄今在高效液相色譜中應用最廣泛的技術，主要是因為它適用于分析極大多數的非極性物質和很多的可離子化的離子化合物。大多數用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的物質也能以同樣的保留方式分離。圖片來源于網絡 固定相上還有
解析通用型反相液相色譜柱的再生
關于通用型反相液相色譜柱的再生： 色譜柱污染后把篩板卸下來超聲清洗 對于色譜柱的污染，首當其沖的就是篩板，因此常用的做法就是把柱頭卸下來，把篩板拿去超聲清洗。但是我們在拆卸過程中對色譜柱前端填料的損害遠遠大于污染照成的傷害，因為我們不是專業的。因此建議這一步能不做就不做。 自己
反相色譜色譜柱的選擇
色譜柱是HPLC系統非常關鍵的一部分,隨著色譜技術的發展,它也不斷地更新換代,長度變得越來越短,填料顆粒也越來越細。現在常用的色譜柱長度在30～250 mm,顆粒直徑在1.6～5μm。顆粒類型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多鍵合相選擇的優點,表面多孔具有反壓低、峰形好的優
反相色譜柱的選擇
1.柱子的PH值使用范圍反相柱優點是固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解；當PH值大于7時硅膠易溶解；經常使用緩沖液固定相要降解。一旦發生上述情況，色譜柱人口處會塌陷
反相色譜柱的選擇
反相色譜柱的選擇：? 1.柱子的PH值使用范圍? 反相色譜柱優點是固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。? 一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解;當PH值大于7時硅膠易溶解;經常使用緩沖液固定相要
反相色譜柱效能評價
一、反相色譜柱評價條件 對于一根填充柱來說，最基本的柱性能評價指標是柱效和峰對稱的測定。反相色譜柱評價所需常用的流動相一般是甲醇或者乙腈與水的體系，對于含有酸堿性組份的樣品，流動相為甲醇或者乙腈與緩沖鹽的體系；檢測波長一般在254nm下檢測，因為在此波長處，甲醇、乙腈，磷酸緩沖
反相色譜柱效能評價
一、反相色譜柱評價條件對于一根填充柱來說，最基本的柱性能評價指標是柱效和峰對稱的測定。反相色譜柱評價所需常用的流動相一般是甲醇或者乙腈與水的體系，對于含有酸堿性組份的樣品，流動相為甲醇或者乙腈與緩沖鹽的體系；檢測波長一般在254nm下檢測，因為在此波長處，甲醇、乙腈，磷酸緩沖鹽均沒有紫外吸收，而且標
什么是反相色譜柱
固定相為非極性的色譜柱。在反相鍵合相色譜中，溶劑的極性越弱洗脫能力越強，即弱極性溶劑的洗脫強度更大
關于通用型反相液相色譜柱的保存和再生
關于通用型反相液相色譜柱的保存： 保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用 理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化，但是由于液相色譜柱內部保存的有機系具有揮發性，因此在使用前還是應該用小流速的和色譜柱內部相同的溶劑沖洗一定的時間。 通用型反相液相色譜柱應該保存在純乙腈或甲
關于通用型反相液相色譜柱的保存和再生
關于通用型反相液相色譜柱的保存： 保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用 理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化，但是由于液相色譜柱內部保存的有機系具有揮發性，因此在使用前還是應該用小流速的和色譜柱內部相同的溶劑沖洗一定的時間。 通用型反相液相色譜柱應該保存在純乙腈或甲
關于通用型反相液相色譜柱的保存和再生
保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化，但是由于液相色譜柱內部保存的有機系具有揮發性，因此在使用前還是應該用小流速的和色譜柱內部相同的溶劑沖洗一定的時間。?通用型反相液相色譜柱應該保存在純乙腈或甲醇中根據色譜柱內部保存液具有揮發性，因此為了減少其揮發速度，可
色譜柱沖洗的那些事兒（反相色譜柱）
衣服穿久了要洗，色譜柱用久了要沖，不過沖洗色譜柱可不像洗衣服那么簡單，到底該怎么洗，還是有些門道的：第一個問題：用什么沖1.1：什么叫沖洗色譜柱通常，色譜柱沖洗就是把色譜柱上的臟東西和對色譜柱有損壞的東西沖出來，并且保存在合適的溶劑中；還有另一種情況，也可以算作沖洗的范疇，就是梯度方法間重新平衡色譜
反相色譜柱與正向色譜柱的區別
倒置或法線相位是基于相對于固定相位的移動相位的極性。如果流動相的極性強于固定相，則稱為反相色譜；如果流動相的極性弱于固定相，則稱為正相色譜。反相色譜流動相極性強，易攜帶極性分子，留下非極性分子。主要用于非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜就是這樣，有些人喜歡說，反相液相色譜其實是一種意義，也就是說，
色譜柱沖洗的那些事兒（反相色譜柱）
衣服穿久了要洗，色譜柱用久了要沖，不過沖洗色譜柱可不像洗衣服那么簡單，到底該怎么洗，還是有些門道的：第一個問題：用什么沖1.1：什么叫沖洗色譜柱通常，色譜柱沖洗就是把色譜柱上的臟東西和對色譜柱有損壞的東西沖出來，并且保存在合適的溶劑中；還有另一種情況，也可以算作沖洗的范疇，就是梯度方法間重新平衡色譜
色譜柱的再生
高效液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降。需要定期進行徹底清洗和再生。1、反相柱分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。2、正相柱分別用正己烷、
色譜柱的再生
?反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V)，純甲醇，二氯甲烷等溶劑作流動相，順次沖洗，每種流動相流經色譜柱的量為20一30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。?正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱每步注意平衡溶劑的順序，不要顛倒每種流動相流經色譜柱的量為20
正相色譜柱與反相色譜柱的區別
色譜柱的安裝 1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線，同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前，確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。 2、為了使色譜柱與儀器系統
正相色譜柱與反相色譜柱的區別
色譜柱的安裝：1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配.為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度.安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常.對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱.2、為了使色譜柱與儀器系統達最佳
正相色譜柱與反相色譜柱的區別
色譜柱的安裝：1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配.為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度.安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常.對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱.2、為了使色譜柱與儀器系統達最佳
如何區分正相色譜柱和反相色譜柱
?本質上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強,洗脫順序由弱到強；反相色譜柱填料極性弱，洗脫順序由強到弱。以下是詳細說明：1、正相色譜? ?? 正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其他具有極性官能團胺基團，如（NH2，APS）和氰基團（CN，CPS）的鍵合相填料。? ?? 由于硅膠
液相色譜柱的色譜柱再生
?液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降，需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。 2、正相柱
液相色譜柱的色譜柱再生
液相色譜柱的色譜柱再生? ?液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降，需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次
反相色譜柱的平衡方法
聚合物基質的反相色譜柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物，制備而成具有不同孔徑和粒徑大小的各種規格的產品。TSKgel?聚合物基質反相色譜柱適用于較寬的pH范圍，即使在高pH下也具有很好的重復性。這類色譜柱在pH2-12下表現出極其穩定的化學特性。因此，在硅膠基質色譜柱適用受限的堿性pH下仍然可以使用。??
反相色譜柱的平衡方法
反相色譜柱的平衡方法????聚合物基質的反相色譜柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物，制備而成具有不同孔徑和粒徑大小的各種規格的產品。TSKgel?聚合物基質反相色譜柱適用于較寬的pH范圍，即使在高pH下也具有很好的重復性。這類色譜柱在pH2-12下表現出極其穩定的化學特性。因此，在硅膠基質色譜柱適用受限的
反相色譜柱的影響因素
液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱。正相色譜柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱；反相色譜柱填料主要以硅膠為基質，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明：（1）色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明： （1）色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容
色譜柱的再生問題
? 在色譜儀實驗中，色譜柱起著相當中的角色，色譜柱是由柱管和固定相組成，按照拄管的粗細和固定相的填充方式分為填充柱和毛細管柱。測試色譜柱的重要指標一般就是分離度、理論塔板數、峰寬、峰形等，其中分離度和理論塔板數應該更為重要。因為色譜柱是消耗品，隨著使用時間或進樣次數的增加，會出現記錄器上出現的一個個