什么是反向PCR（inversePCR）？
反向PCR（inverse PCR）反向PCR是一種多聚合酶鏈式反應（PCR）應用的方法，可使已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA，以產生適合于PCR擴增大小的片段，然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同 源于環上核心區的末端序列，但其方向可使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引物的核心區。這種反向PCR方法可用于擴增本來就在核心區旁邊的序列，還可 應用于制備未知序列探針或測定邊側區域本身的上、下游序列。用傳統的緩沖液和其他提供者推薦的條件裂解DNA。反向PCR所擴增的片段的大小由 PCR擴增片段的大小決定，目前，PCR擴增的實際上限為3-4 kb。在許多情況下，首先需要進行Southern雜交來確定內切酶用以產生大小適于環化及反向PCR的片段的末端片段。能裂解核心區的內切酶使反向 PCR只能擴增引物所定模板（依賴于引物）的上游或上游區，而不裂解核心區的酶則使兩上邊側......閱讀全文
反向PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間（指向內部）的一段 DNA 片段的擴增。與此相反，反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列，這種未知
反向PCR
主要內容如下：·?????????RT-PCR·?????????Competitive and Quantative RT-PCR·?????????In Situ RT-PCR·?????????RL-PCR·?????????DNA Contamination·?????????RT-PCR
反向PCR
標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間（指向內部）的一段 DNA 片段的擴增。與此相反，反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列，這種未知序列沒有引物可以利用。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原
反向PCR
實驗方法原理?標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間（指向內部）的一段 DNA 片段的擴增。與此相反，反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列，這種未知序列沒有引物可以利用。該項技術由幾個研究小組開發（Ochm
什么是反向 PCR？反向 PCR的特點
常規 PCR 是擴增兩引物之間的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物來擴增兩引物以外的 DNA 片段。一般先用限制性內切酶酶解 DNA(目的基因中不存在該酶的酶切位點,且片段應短于2～3kb),然后用連接酶使帶有黏性末端的靶片段自身環化,最后用一對反向引物進行 PCR,得到
反向PCR（inverse PCR）簡介
反向PCR是一種多聚合酶鏈式反應（PCR）應用的方法，可使已知序列的核心區邊側的未知DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA，以產生適合于PCR擴增大小的片段，然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區的末端序列，但其方向可使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開
反向PCR （inverse-PCR）
實驗方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位點側翼DNA序列非常有效的方法。?1. ?選擇合適的限制性內切酶位點。并在T-DNA的邊界（左邊界、右邊界均可）和酶切位點附近設計引物P1、P2；2. ?回收DNA，T4連接酶連接，使酶切后的DNA片段環化；3. ?回收連接后的DNA，用引物P1、P2做
反向PCR （inverse-PCR）
利用反向PCR可對未知序列擴增后進行分析，探索鄰接已知DNA片段的序列，并可將僅知部分序列的全長cDNA進行分子克隆，建立全長的DNA探針。可用于：（1）基因游走研究；（2）轉位因子研究；（3）已知序列DNA旁側病毒整合位點分析等研究。實驗方法原理反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色
PCR技術（十四）：反向PCR
描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法，使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA，以產生適合于PCR擴 增大小的片段，然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列，但其方向性，使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引
反向PCR （inverse-PCR）
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列，因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補，但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA，然后用DNA連接