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  • 第十五屆離子色譜學術會盛大召開聚焦新技術新應用

    2014年9月20日第十五屆全國離子色譜學術報告會在四川省成都市新華國際大酒店盛大召開。本次會議由中國儀器儀表學會分析儀器分會離子色譜專業委員會主辦,會議邀請國內離子色譜界的專家做大會特邀報告、邀請報告、專題報告,還邀請到國內外色譜儀器與相關設備、部件生產廠商展示最新產品并舉辦專題講座,共同交流和探討我國離子色譜研究和應用的近年來的最新成果,參會人數達到100余位。 會議現場 中國科學院大連化學物理研究所 張玉奎院士 來自中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎院士為大家帶來《蛋白質分子印跡技術進展》精彩大會特邀報告。 張玉奎院士的報告主要闡述分子印跡和蛋白組學,三代蛋白質分子印跡材料包括蛋白質印跡整體材料、蛋白質印跡表面材料和抗原決定基印跡聚合物。蛋白質組是細胞、組織或生物體的所有蛋白質的表達。蛋白質組學是蛋白質的大規模研究特別是其結構和功能。 報告介紹了蛋白質樣品處理進展,即......閱讀全文

    如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜

      硝酸纖維素膜(NC膜)是蛋白和核酸雜交zui常用的印跡膜,是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下,大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起,雖然這其中的機制還不是十分清楚,但由于硝酸纖維素膜的這個特性,而且易于封閉非特異性結合,從而得到了廣泛的

    如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜?

    硝酸纖維素膜(NC膜)是蛋白和核酸雜交最常用的印跡膜,是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下,大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起,雖然這其中的機制還不是十分清楚,但由于硝酸纖維素膜的這個特性,而且易于封閉非特異性結合,從而得到了廣泛的應用。目

    Western印跡法檢測蛋白

    實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗

    Western印跡法檢測蛋白

    實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗

    全自動蛋白印跡儀

    全自動蛋白印跡儀,產品性能結構及組成該產品主要由控制部分、樣本槽、加樣通道、配套用瓶、吸入及加樣泵組成。

    蛋白質印跡法

    蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里

    蛋白質印跡法

    值得一提的是,western blot這個名稱的由來很有意思。最開始做印跡工作的是一個叫做Edwin Southern的科學家,但印跡的對象是DNA鏈,他把這種技術稱為Southern blot,后來類似的出現了兩個過程相似,但是對象不同的印跡方法,一個針對RNA,一個針對蛋白質,人們分別把這兩種技

    全自動蛋白印跡儀

      The new generation ProfiBlot 48 is used for the confirmation of infectiousautoimmune diseases, for the screening of allergies as well as for forensi

    蛋白質印跡實驗

    試劑、試劑盒?甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟 1. 溶液配置(1) 連續緩沖系統甘氨酸 39 mmol/L;Tris 48 mmol/L;SDS 0.0375% ( W/V);甲醇 20% (V/V)。溶液均需用雙蒸水配置。這個緩沖系統可用作陽極緩沖液,也可用作陰極緩沖液。(2) 不連續緩沖系統陽

    蛋白印跡(Western-Blot)常用試劑

    蛋白印跡(Western Blot)常用試劑>>>蛋白抽提貨號品名規格價格備注WB003組織蛋白抽提試劑100ml300全蛋白抽提WB004RIPA裂解液100ml100全蛋白抽提WB005細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑100次680WB006膜蛋白和胞質蛋白抽提試劑100次680WB007改良We

    蛋白質印跡實驗

    從SDS凝膠上轉移蛋白質 從瓊脂糖凝膠上轉移蛋白質 從等電聚焦凝膠上轉移蛋白 檢測 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒

    蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)——Western印跡法

    實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒裂解液PBSG 250考馬斯亮藍溶液NaClSDS上樣緩沖液電泳緩沖液轉移緩沖液麗春紅染液封閉液TBSTTBS洗脫抗體緩沖液顯影液定影液抗體化學發光試劑儀器、耗材高壓鍋玻璃勻漿器高速離心機分光光度儀-20℃低溫冰箱垂直板電泳轉移裝置恒溫水浴搖床多用脫色搖床實驗步驟一、操

    蛋白質印跡法原理

    與Southern Blot或Northern Blot雜交方法類似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附

    蛋白質印跡(Western-blotting)

    印跡法(blotting)是指將樣品轉移到固相載體上,而后利用相應的探測反應來檢測樣品的一種方法。1975年,Southern建立了將 DNA轉移到硝酸纖維素膜(NC膜)上,并利用DNA-RNA雜交檢測特定的DNA片段的方法,稱為Southern印跡法。而后人們用類似的方法,對 RNA和蛋白

    蛋白質免疫印跡實驗

    實驗步驟 操作流程(1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張,吸水濾紙 2 張 (Whatman 3 MM)。(2) 將凝膠在轉印緩沖液中浸泡 30m in,將轉移膜、濾紙和海綿墊也在同樣的緩沖液浸濕。(3) 安裝轉印「夾心三明治」。將凝膠放置在玻璃平板上,然后將一張浸濕的濾紙放在凝膠上,如

    蛋白印跡儀的工作原理簡介

      蛋白印跡儀被廣泛應用于臨床診斷領域,如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源(如病毒或細菌),以及過敏原鑒定。全自動蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關鍵步驟自動化,尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。  蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的

    如何閱讀蛋白質印跡

    Western印跡是臨床醫生可能會使用或要求的一種診斷技術。Western印跡通過分離樣品(通常是血液樣品)中的所有不同蛋白質來發揮作用。一旦分離了這些蛋白質,就可以使用稱為抗體的物質來檢測特定的蛋白質。這些特定蛋白質的存在與否,或檢測到的蛋白質的水平,將導致診斷。如果使用診斷性蛋白質印跡,則臨床醫

    關于蛋白印跡儀的應用介紹

      傳統蛋白分析的實驗技術主要是蛋白印跡,由于操作步驟多,操作繁瑣,每一步的失誤都會造成全盤失敗,從而重復實驗,對于珍貴樣品,更是要倍加小心。另外,試驗流程長,結果重復性差,要達到好的實驗結果,成本也會很高。自動蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關鍵步驟自動化,尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。

    蛋白質印跡實驗——檢測

    試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟電泳轉移后,小心地從固定化材料上剝離凝膠。如果有小塊凝膠留在膜上,用雙蒸水洗,然后用濕的軟棉花擦去凝膠,殘留在膜上的凝膠會導致染色后在膜上出現 “白點”。膜可以貯存,也可以立即染色或用其他方式檢測。大部分用于電泳的染色方法都可用于膜。主要的限制是背景染色。

    蛋白質免疫印跡實驗

    這是一個建立在 B urnette 實驗方案基礎上的實驗流程,小于 80k D a 的蛋白質的轉移效果很好并且結果穩定, 重復性好。應用這種膜轉移方法,我們利用多克隆抗體在下面的樣本中檢測目的蛋白:哺乳動物細胞和細菌溶解產物、細胞培養上清、組織提取物以及組織液。雖然下列實驗條件是根據我們自己的實驗需

    表達蛋白檢測實驗_點印跡法

    實驗方法原理本方案用DNA點跡雜交檢測噬斑以鑒定重組病毒。像點跡雜交一樣,將感染細胞裂解物印跡在硝酸纖維素膜上(可參考「痘苗DNA檢測實驗」中「斑點雜交法」)。用可以識別外源基因表達蛋白的抗體與膜一起孵育,用125I 標記的蛋白 A 檢測結合的抗體,還可應用化學發光檢測系統,如 Amersham E

    蛋白質免疫印跡技術

    實驗概要免疫印跡是利用聚丙烯酰胺凝膠電泳來檢測樣品或提取物中某種特定蛋白的方法。聚丙烯酰胺凝膠緊貼著膜放置,在電流的作用下蛋白質從凝膠遷移到膜上并且被固定,常用的膜是硝酸纖維素或 PVDF(聚偏乙烯氟化物)。膜是凝膠蛋白質的復制品,然后可以與抗體結合后進行染色。實驗步驟1.?? 樣品準備1)?? 抽

    蛋白質印跡法分類

    Western Blot顯色的方法主要有以下幾種:i. 放射自顯影ii. 底物化學發光ECLiii. 底物熒光ECFiv. 底物DAB呈色現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用第一種方法,發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理

    蛋白質免疫印跡實驗

    蛋白質免疫印跡實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 操作流程 (1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張,吸水濾紙 2 張

    蛋白質免疫印跡組織蛋白提取簡介

      1)所需器材:制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管(最好高溫高壓處理)、一個大冰盒、一個1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高溫高壓處理)、新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織、保存于4℃冰箱的PBS(最好高溫高壓處理)、移液槍、吸頭(最好高溫高壓處理)、兩套研磨棒(最好高溫高壓處理)、掌上離

    第十五屆離子色譜學術會盛大召開--聚焦新技術新應用

      2014年9月20日第十五屆全國離子色譜學術報告會在四川省成都市新華國際大酒店盛大召開。本次會議由中國儀器儀表學會分析儀器分會離子色譜專業委員會主辦,會議邀請國內離子色譜界的專家做大會特邀報告、邀請報告、專題報告,還邀請到國內外色譜儀器與相關設備、部件生產

    蛋白質印跡法的概念

    蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里

    蛋白質印跡法的分類

    顯色的方法主要有以下幾種:i. 放射自顯影ii.?底物化學發光ECLiii. 底物熒光ECFiv. 底物DAB呈色現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用第一種方法,發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理如下(二抗用HRP標記)

    什么是蛋白質印跡測試?

    Western blot測試,也稱為免疫印跡,是對蛋白質混合物中特定蛋白質的測試。蛋白質印跡試驗是在凝膠電泳或酶聯免疫吸附測定(ELISA)試驗后進行的,它使用抗體來鑒定特定的蛋白質。SDS頁面十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是用于分離蛋白質以進行蛋白質印跡的常用測試。當蛋白質通

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